[發明專利]產共軛亞油酸的食品級重組乳酸乳球菌及其構建方法與應用

有效

• 申請號: 201310066107.1
• 申請日: 2013-03-01
• 公開（公告）號: CN103146628A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 茍克勉;李世麗
• 申請（專利權）人: 茍克勉
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/74;C12P7/64;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.重組乳酸乳球菌，其特征在于：所述重組乳酸乳球菌是乳酸乳球菌（Lactococcus?lactis）PAI-75，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的登記入冊編號為CGMCC?No.7148。

2.構建重組乳酸乳球菌的方法，包括將蛋白質PAI的編碼基因導入作為宿主菌的乳酸乳球菌中得到反式-10，順式-12共軛亞油酸的轉化效率高于所述宿主菌的重組乳酸乳球菌的步驟；

所述蛋白質PAI為如下a）或b）的蛋白質：

a）由SEQ?ID?No.2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

b）將SEQ?ID?No.2的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有亞油酸異構酶活性，或具有亞油酸異構酶活性由a）衍生的蛋白質。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述蛋白質PAI的編碼基因為如下1）或2）或3）的DNA分子：

1）其編碼序列是SEQ?ID?No.1的DNA分子；

2）在嚴格條件下與1）限定的DNA分子雜交且編碼所述蛋白質PAI的DNA分子；

3）與1）限定的DNA分子具有90％以上的一致性且編碼所述蛋白質PAI的DNA分子。

4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述宿主菌為食品級乳酸乳球菌和/或其衍生菌；

所述蛋白質PAI的編碼基因通過重組食品級表達載體導入所述宿主菌中。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述食品級乳酸乳球菌為乳酸乳球菌NZ3900或其衍生菌株、和/或乳酸乳球菌MG1363或其衍生菌、和/或乳酸乳球菌LM0230或其衍生菌、和/或乳酸乳球菌IL1403或其衍生菌，所述重組食品級表達載體為權利要求8或9所述的重組食品級表達載體。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述重組乳酸乳球菌為乳酸乳球菌（Lactococcus?lactis）PAI-75，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的登記入冊編號為CGMCC?No.7148。

7.由權利要求2-5中任一所述方法構建的反式-10，順式-12共軛亞油酸的轉化效率高于所述宿主菌的重組乳酸乳球菌。

8.表達權利要求2或3所述蛋白質PAI的編碼基因的重組食品級表達載體。

9.根據權利要求8所述的重組食品級表達載體，其特征在于：所述重組食品級表達載體是將權利要求2或3所述蛋白質PAI的編碼基因插入pNZ8149的多克隆位點得到的重組表達載體。

10.權利要求1所述的重組乳酸乳球菌或權利要求2-5中任一所述方法構建的重組乳酸乳球菌在生產反式-10，順式-12共軛亞油酸中的應用。