[發(fā)明專利]一種用于轉(zhuǎn)基因水稻篩查的重組標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒及試劑盒無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310065278.2 | 申請(qǐng)日: | 2013-03-01 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103215346A | 公開(公告)日: | 2013-07-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 汪小福;陳笑蕓;徐俊鋒;繆青梅;朱妍晴;朱青 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號(hào): | C12Q1/68 | 分類號(hào): | C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/62 |
| 代理公司: | 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201 | 代理人: | 黃美娟;冷紅梅 |
| 地址: | 310021 *** | 國(guó)省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 用于 轉(zhuǎn)基因 水稻 重組 標(biāo)準(zhǔn) 質(zhì)粒 試劑盒 | ||
1.一種用于轉(zhuǎn)基因水稻篩查的重組標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒,由如下方法獲得:將SEQ?IDNo.1所示的CaMV35S基因、SEQ?ID?No.2所示的SPS基因、SEQ?IDNo.3所示的Bt基因、SEQ?ID?No.4所示的NPTⅡ基因、SEQ?ID?No.5所示的Htp基因、SEQ?ID?No.6所示的Bar基因和SEQ?ID?No.7所示的NOS基因依次連接獲得融合片段,再將所得融合片段克隆到載體pUC-19中,獲得所述重組標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒,記為pUC-RS。
2.如權(quán)利要求1所述的重組標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒,其特征在于所述融合片段核苷酸序列如SEQ?ID?No.8所示。
3.如權(quán)利要求1所述的重組標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒在轉(zhuǎn)基因水稻篩查中的應(yīng)用。
4.一種用于轉(zhuǎn)基因水稻篩查的檢測(cè)試劑盒,主要包括權(quán)利要求1所述的重組標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒和特異性引物;所述特異性引物序列如下:
CaMV35S基因特異性引物:
35S-F:GCTCCTACAAATGCCATCATTGC
35S-R:GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC
SPS基因特異性引物:
SPSF:ATCTGTTTACTCGTCAAGTGTCATCTC
SPS-R:GCCTAGGATTACATATGGCAAGA
Bt基因特異性引物:
Bt-F:GAAGGTTTGAGCAATCTCTAC
Bt-R:CGATCAGCCTAGTAAGGTCGT
NPTⅡ基因特異性引物:
Npt-F:ACTGGGCACAACAGACAATCG
Npt-R:GCATCAGCCATGATGGATACTTT
Htp基因特異性引物:
Hpt-F:GAAGTGCTTGACATTGGGGAGT
Hpt-R:AGATGTTGGCGACCTCGTATT
Bar基因特異性引物:
Bar-F:ACCATCGTCAACCACTACATCG
Bar-R:GCTGCCAGAAACCCACGTCAT
NOS基因特異性引物:
Nos-F:GAATCCTGTTGCCGGTCTTG
Nos-R:TTATCCTA?GTTTGCGCGCTA。
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