[發明專利]一種生產紫杉二烯的酵母菌及構建方法及應用

無效

• 申請號: 201310064551.X
• 申請日: 2013-02-28
• 公開（公告）號: CN103146730A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 元英進;閆慧芳;丁明珠;賈云婧
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: C12N15/60
• 分類號: C12N15/60;C12N9/88;C12N15/81;C12N1/19;C12P17/02;C12R1/865
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

1.一種紫杉二烯合酶基因，其特征是它是序列表SEQ?ID?NO:13所述的核苷酸序列。

2.權利要求1的一種紫杉二烯合酶基因編碼的蛋白質，其特征是它是序列表SEQ?ID?NO:14所述的氨基酸序列。

3.一種生產紫杉二烯的酵母菌的構建方法，其特征是包括如下步驟：

（1）載體SyBE_001174的構建：

①將啟動子、GGPP合酶基因、終止子采用OE-PCR方法拼接起來，得到兩端包含HindⅢ和ApaⅠ位點的片段，連接入游離型載體pRS425；

②將啟動子、序列表SEQ?ID?NO:13所示的紫杉二烯合酶基因、終止子采用OE-PCR方法拼接起來，得到兩端包含SacⅠ和HindⅢ位點的片段，連接入步驟①獲得的載體，得到載體SyBE_001174；

(2)載體SyBE_001187的構建：

①將酵母組成型啟動子、tHMGR基因、終止子應用OE-PCR法拼接起來，得到兩端包含XhoⅠ和ApaⅠ位點的片段，連接至整合型載體pRS403；

②將酵母組成型啟動子、ERG20基因、終止子應用OE-PCR法拼接起來，得到兩端包含SacⅠ和XhoⅠ兩個位點的片段，連接至步驟①獲得的載體，得到載體SyBE_001187；

所述GGPP合酶基因是序列表SEQ?ID?NO:9所述的核苷酸序列；所述tHMGR基因是序列表SEQ?ID?NO:3所述的核苷酸序列；所述ERG20基因是序列表SEQ?ID?NO:7所述的核苷酸序列；

（3）將所述載體SyBE_001174、SyBE_001187導入到釀酒酵母W303-1A或釀酒酵母BY4742中，得到生產紫杉二烯的酵母菌。

4.權利要求3的一種生產紫杉二烯的酵母菌的構建方法構建的酵母菌。

5.權利要求4的酵母菌在生產紫杉二烯的用途。