[發明專利]傅立葉變換紅外光譜技術對12種真菌的分類鑒定

無效

• 申請號: 201310063973.5
• 申請日: 2013-02-22
• 公開（公告）號: CN103217399A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發明（設計）人: 楊麗君;李兆杰;王靜;徐成鋼
• 申請（專利權）人: 威海出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N21/35
• 分類號: G01N21/35;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于對12種常見真菌的快速分類鑒定方法，具體地說是用傅立葉變換紅外光譜(Fourier?transform?infrared?spectroscopy，FT-IR)技術對禾谷鐮孢霉(Fusarium?graminearum，F.graminearum)、棲土曲霉(Aspergillus?terricola，A.terricola)、黃暗青霉(Penicillium?citreonigrum，P.citreonigrum)、黃曲霉(Aspergillus?flavuus，A.flavus)、寄生曲霉(Aspergillus?parasiticus，A.parasiticus)、桔灰青霉(Penicillium?aurantiogriseum，P.aurantiogriseum)、擬康氏木霉(Trichoderma?pseudokoningii，T.pseudokoningii)、土生鏈孢霉(Alternaria?humicola，A.humicola)、鮮綠青霉(Penicillium?viridicatum，P.viridicatum)、煙曲霉(Aspergillus?funigatus，A.funigatus)、雜色曲霉(Aspergillus?versicolor，A.uersicolor)、茄病鐮刀菌(Fusarium?solani，F.solani)進行快速分類鑒定。

背景技術

真菌特別是植物病原真菌，種類繁多且分布廣泛，是引起小麥、水稻、大豆、蔬菜、花卉等大田作物和園藝作物病害的重要病原物，病害的發生經常造成作物大面積減產和糧食品質下降，有些屬能引起人類和一些動物皮膚病等。另外，一些真菌常產生劇毒的代謝產物，摻入植物性食品中，對人類健康危害較大，如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等，其會破壞人或動物的肝臟組織及免疫系統，具有較強的致癌性。如產黃曲霉毒素的黃曲霉菌、寄生曲霉，產赭曲霉毒素的曲霉菌屬和青霉菌屬等。因此快速準確地對這些真菌進行鑒定是防治植物病害和食品真菌毒素污染的重要技術手段。

FT-IR技術以未損傷細胞的FT-IR光譜的特殊指紋區為基礎，光譜反映的是整個細胞所有組成成分的化學鍵的振動情況，因此可以區分生化信息上的差別。FT-IR提供整個微生物菌體生化組成成分的光譜定量信息，反應微生物的信息相比更全面。其優點在于分辨率高、鑒定時間短、成本低。但光譜技術在微生物分類鑒定中的應用尚不夠系統和成熟，尚不夠規范，有待對其進行統一并形成標準方法。目前國內外還沒有對上述12種真菌的規范、統一的FT-IR分類鑒定方法公開，也沒有關于13種真菌FT-IT光譜信息共享數據庫的公開，該發明可彌補上述缺陷，建立12種真菌的規范、統一的FT-IR分類鑒定方法。

發明內容

本發明屬于對12種真菌的分類鑒定，具體地說是應用FT-IR技術，結合化學計量學運算，實現對F.graminearum、A.terricola、P.citreonigrum、A.flavus、A.parasiticus、P.aurantiogriseum、T.pseudokoningii、A.humicola、P.viridicatum、A.funigatus、A.uersicolor、F.solani的分類鑒定。包括建立12種標準菌株光譜信息數據庫，規范并統一細菌培養條件、樣品制備條件、光譜采集參數及數據分析方法等。

本發明所采用的技術方案為：應用FT-IR技術，建立F.graminearum、A.terricola、P.citreonigrum、A.flavus、A.parasiticus、P.aurantiogriseum、T.pseudokoningii、A.humicola、P.viridicatum、A.funigatus、A.uersicolor、F.solani等12種標準菌株的光譜信息數據庫，同時規范并統一細菌培養條件、樣品制備條件、光譜采集參數及數據分析方法。采用相同細菌培養、樣品制備及光譜采集方法，獲得可疑待測菌的光譜數據，與12種標準菌株的光譜信息數據庫合并，并進行分級聚類分析(hierarchical?cluster?analysis，HCA)，相同菌的圖譜應歸為一類，根據獲得可疑待測菌的歸類圖譜情況，實現對待測菌的分類鑒定。

本發明涉及的12種真菌的FT-IR分類鑒定方法，依次包括下列步驟(1)-(2)：

(1)建立12種真菌的紅外光譜信息數據庫