[發明專利]MiR-31抑制劑用于抑制血管損傷后再狹窄的用途

在審

• 申請號: 201310062632.6
• 申請日: 2013-02-28
• 公開（公告）號: CN103316342A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 韓雅玲;汪潔;閆承慧;張效林;陶杰;李洋;田孝祥
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍沈陽軍區總醫院
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61P9/10;A61P9/00;A61L31/16;C12Q1/68
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李帆

技術領域

本發明涉及microRNA及其抑制劑的醫藥用途，具體涉及miR-31抑制劑用于制備抑制血管損傷后再狹窄的藥物中的用途。本發明還涉及miR-31用于調控細胞E1A激活基因阻遏子蛋白的用途，和用于調控血管平滑肌細胞表型轉化的用途。

背景技術

動脈粥樣硬化（AS）、經皮冠狀動脈介入治療（PCI）術后再狹窄（RS）、移植后動脈病以及肺動脈高壓等許多心血管系統疾病作為危害人類健康的危重疾病受到廣泛關注。近年研究發現，成熟血管壁的血管平滑肌細胞（VSMC）在血管損傷后發生表型逆轉，由生理狀態下的分化表型（收縮表型）轉變為去分化表型（合成表型），并獲得增殖、遷移及合成、分泌大量細胞外基質的能力。VSMC由分化表型向去分化表型的轉化是AS及PCI術后RS等疾病發生過程中新生內膜形成和管腔狹窄的重要病理基礎。因此，對VSMC表型轉化機制的研究是增生性血管病防治研究的重要方向。然而，在當今表型調控的研究領域，VSMCs表型基因表達的調控機制還有待明確。

人E1A激活基因阻遏子（human?cellular?repressor?of?E1A-stimulated?gene,hCREG）基因是1998年哈佛醫學院Gill克隆的一個細胞分化調控基因（Veal?E，Mol?Cell?Biol，1998；18(9):5032-5041）。前期研究證實，在VSMC由合成型向分化型轉化的過程中，CREG蛋白及mRNA的表達水平顯著升高（Han?Ya-Ling,Zhonghua?Yi?Xue?ZaZhi,2005；85(1):49-53；Han?Ya-Ling,J?Mol?Cell?Cardiol，2011；50(4):723-30；Han?Ya-Ling,J?Mol?Cell?Cardiol，2010；48(6):1225-35），并且hCREG蛋白表達能明顯抑制體外培養的人胸廓內動脈平滑肌細胞-HITASY的增殖并促進其分化（Han?Ya-Ling,Chinese?Journal?of?Cellular?and?Molecular?Immunology,2005;21(5):570-574；Han?Ya-Ling,Prog?Biochem?Biophys,2004;31(12):1099-1105；Han?Ya-Ling,Prog?Biochem?Biophys,2005;32(6):517-522）。研究還發現，在球囊損傷后的大鼠頸動脈血管中，血管中膜的CREG基因的表達明顯下降，且過表達CREG可以抑制VSMC的增殖和新生內膜的形成（Han?Ya-Ling，Cardiovasc?Res,2008；78(3):597-604；Han?Ya-Ling，J?Vasc?Surg，2008；48(1):201-9），同時，經外膜包裹導入的pLNCX2-hCREG逆轉錄病毒有效抑制了球囊拉傷后小鼠頸動脈狹窄的發生（Han?Ya-Ling，Chinese?Journal?of?Pathophysiology,2007;23(10):1873-1877）。上述研究提示，hCREG是調控VSMCs分化的重要因子，在臨床PCI術后RS的防治研究中具有潛在重要意義。但是，調控CREG基因表達的上游信號分子機制尚未闡明。

近年研究發現，miRNA（microRNA,miR）在基因表達調控方面具有重要作用，是基因調控領域的一個新的發現和突破口。miRNAs是一類內生的、非編碼的小RNA，它通過抑制或者降解靶基因的mRNA，負性調節靶基因的表達。細胞中大約有30%的基因可受到miRNAs的直接調控。而且，單個miRNA可調節多個基因的表達。因此，miRNA是一個重要的轉錄因子，并且對細胞生物功能的調節起到了重要的作用。最近報道指出，miRNAs參與了很多心血管系統疾病的發生，其中與VSMCs表型轉化基因有單一結合靶點的miRNAs的發現，揭示了心血管系統穩態的調節及血管損傷治療靶點選擇的重要機制。有研究指出，miR-31與腫瘤細胞的增殖、分化、遷移和轉移有關，但其對于VSMC是否有調控作用，值得更加深入的研究。

發明內容

本發明通過大量實驗證實，miR-31通過與hCREG?mRNA3’UTR區結合，調控hCREG蛋白的表達，進而參與VSMC從分化表型到去分化表型的調控，由此完成了本發明。