[發(fā)明專(zhuān)利]含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的抗原在制備輔助診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡試劑中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310061233.8
• 申請(qǐng)日: 2013-02-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104007266A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張偉;郭莎;劉瑩;馬友楠;趙青;邵躍虎;吳鳳岐;高瑞通
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;北京愛(ài)博生生物技術(shù)有限公司;首都兒科研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及含有6-N-甲基賴(lài)氨酸（又名N_ε-甲基-L-賴(lài)氨酸，N₆-甲基-L-賴(lài)氨酸）殘基的多肽或蛋白質(zhì)抗原的新用途，特別涉及含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的抗原在制備輔助診斷或篩查系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）試劑或試劑盒中的應(yīng)用。?

背景技術(shù)

蛋白質(zhì)翻譯后修飾如糖基化、磷酸化、泛素化、乙酰化、甲基化、SUMO化等等是重要的生命現(xiàn)象，影響著基因的表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞的活化與抑制、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能各個(gè)方面。和本發(fā)明相關(guān)的是賴(lài)氨酸的甲基化修飾，該修飾主要發(fā)生在細(xì)胞核的組蛋白中，少量的其他一些蛋白如p53,NFκB,STAT3等也會(huì)發(fā)生賴(lài)氨酸甲基化修飾。賴(lài)氨酸甲基化修飾有三種形式，即其側(cè)鏈ε氨基的一、二、三甲基化，這些修飾與基因的沉默和活化密切相關(guān)，是近些年來(lái)表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域的研究重點(diǎn)。各種組蛋白，即連接組蛋白(H1),形成核小體的核心組蛋白(H2A、H2B、H3和H4)以及一些組蛋白變體都可以發(fā)生賴(lài)氨酸甲基化修飾，其中組蛋白H3的第4、9、27、36和79位，H4的第20位賴(lài)氨酸甲基化修飾最為常見(jiàn)。?

盡管蛋白質(zhì)翻譯后修飾具有重要的作用，但是各種修飾也帶來(lái)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的變化，可為自身抗體提供新的表位。這些新表位可被T細(xì)胞或者B細(xì)胞的抗原受體識(shí)別，進(jìn)而產(chǎn)生自身反應(yīng)。不過(guò)迄今為止蛋白質(zhì)翻譯后修飾誘導(dǎo)產(chǎn)生自身抗體的研究報(bào)道非常少。Plaué等發(fā)現(xiàn)泛素化的組蛋白H2A和H2B是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的自身抗原。van?der?Vlag等報(bào)道凋亡相關(guān)的組蛋白修飾產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)抗原H2BK12ac、H3K27me3、H4K8ac3、H4K12ac3和H4K16ac3，可被SLE患者和狼瘡鼠的自身抗體識(shí)別。在一例患有盤(pán)狀紅斑狼瘡和慢性淋巴細(xì)胞白血病的患者中發(fā)現(xiàn)了針對(duì)H3K9me3S10ph的抗體。至于蛋白質(zhì)翻譯后修飾在正常人群中是否能產(chǎn)生抗體以及所產(chǎn)生抗體的性質(zhì)幾乎沒(méi)有報(bào)道。?

免疫球蛋白M（IgM）是重要的免疫分子，參與了B細(xì)胞的發(fā)育、體液免疫反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)各種過(guò)程。除了參與常規(guī)的免疫防御，IgM還有一個(gè)重要的功能，即阻止機(jī)體產(chǎn)生病理性的自身免疫反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明缺乏分泌型IgM但是可以分泌其他類(lèi)型抗體的小鼠將自發(fā)產(chǎn)生IgG抗DNA抗體，且腎臟出現(xiàn)IgG和補(bǔ)體沉積。用IgM自身抗體處理的狼瘡鼠產(chǎn)生蛋白尿的時(shí)間較晚，且腎臟受累較輕，生存期明顯延長(zhǎng)。僅含高水平的自身反應(yīng)性IgM，但是缺乏自身反應(yīng)性的IgG的狼瘡鼠腎小球的病理狀況可得到明顯改善，小鼠生存期明顯延長(zhǎng)。在人類(lèi)，已知IgM抗dsDNA抗體水平與腎小球腎病呈負(fù)相關(guān)。具?有高水平的IgM多反應(yīng)性抗體和IgM抗磷脂酰膽堿抗體的SLE患者癥狀往往較輕。IgM抗心磷脂抗體和抗dsDNA抗體在腎臟未損傷的患者中水平較高。由此可見(jiàn)，健康人表達(dá)的自身反應(yīng)性IgM不僅不傷害反而有益于機(jī)體。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的抗原的新用途。?

本發(fā)明所提供的新用途是含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的抗原在輔助診斷或篩查SLE試劑或試劑盒中的應(yīng)用。?

其中，所述的抗原可為含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的多肽或蛋白質(zhì)。當(dāng)所述抗原為含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的多肽時(shí)，該多肽可交聯(lián)到載體蛋白上。?

上述應(yīng)用中，所述抗原為含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的多肽或蛋白質(zhì)或所述多肽與載體蛋白結(jié)合形成的交聯(lián)物。?

上述應(yīng)用中，所述的含有6-N-甲基賴(lài)氨酸的多肽包括但是不限于表1中SEQ?ID?No.1-4中任一所示的多肽。?

在本發(fā)明的實(shí)施方式敘述中，含有6-N-甲基賴(lài)氨酸殘基的多肽為SEQ?ID?No.1-4中任一所示的多肽。?

上述應(yīng)用中，用于交聯(lián)的所述載體蛋白可為不與人IgM特異結(jié)合的蛋白質(zhì)，如牛血清白蛋白（BSA）等。?

上述應(yīng)用中，所述輔助診斷或篩查SLE試劑或試劑盒可為酶聯(lián)免疫試劑或酶聯(lián)免疫試劑盒。?

SEQ?ID?No.1-4中任一所示的多肽也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。?