[發(fā)明專(zhuān)利]一種花茶抗氧化性檢測(cè)新方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310061164.0
• 申請(qǐng)日: 2013-02-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103267733A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-08-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔣彩云;陶恩錦;李小華;楊?lèi)?ài)萍;吳萍;韓文娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 蔣彩云
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/31
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/31
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于納米生物分析技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種基于金納米顆粒的生長(zhǎng)檢測(cè)花茶中抗氧化物總量的方法。

背景技術(shù)

納米技術(shù)與生物技術(shù)的融合，使納米生物技術(shù)獲得了很多重要的進(jìn)展。納米技術(shù)的應(yīng)用已涉及愈來(lái)愈多的領(lǐng)域，生物科技，食品，納米檢測(cè)技術(shù)已成為研究熱點(diǎn)。金納米顆粒作為研究較早的一種納米材料，在生物檢測(cè)中的應(yīng)用逐漸引起世人的重視。金納米顆粒具有特殊的物理化學(xué)性質(zhì)，對(duì)于提高生物檢測(cè)的靈敏度和穩(wěn)定性具有重大意義。近年來(lái)，金納米顆粒在食品檢測(cè)方面的應(yīng)用也引起了人們的關(guān)注。

目前食品檢測(cè)分析一般采用化學(xué)分析法(CA)、薄層層析法(TLC)、氣象色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)，但需要繁瑣、耗時(shí)的前處理，樣品耗損較大。較之于靈敏度較低的CA和TLC方法，GC、HPLC的靈敏度相對(duì)較高，但操作技術(shù)要求高、儀器設(shè)備昂貴，并不適合現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定和普及，而以金納米材料為免疫標(biāo)記物的檢測(cè)技術(shù)止彌補(bǔ)了這些技術(shù)的缺點(diǎn)，迎合現(xiàn)代檢測(cè)的要求，在現(xiàn)代食品分析檢測(cè)中的運(yùn)用也越來(lái)越多。

現(xiàn)有的測(cè)定抗氧化活性的方法有FRAP法、二甲基亞砜法、水楊酸法、TRAP法、DPPH法、ORAC法、次甲基藍(lán)分光光度法。這些檢測(cè)方法有著白身的優(yōu)勢(shì)但也存在著不足，在這些方法的基礎(chǔ)上，采用納米技術(shù)檢測(cè)花茶的抗氧化性，能夠?qū)ú铇悠分兴目寡趸镔|(zhì)的總量進(jìn)行定量分析。

目前為止，尚未有使用納米材料檢測(cè)花茶抗氧化性并定量樣品中抗氧化物質(zhì)總量的技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容

1、發(fā)明目的

本發(fā)明目的足提供一種操作簡(jiǎn)便且檢測(cè)靈敏度高的基于金納米顆粒生長(zhǎng)檢測(cè)花茶的抗氧化性強(qiáng)弱并實(shí)現(xiàn)抗氧化物質(zhì)定量的方法。

2、技術(shù)方案

本發(fā)明所述的測(cè)定花茶抗氧化能力強(qiáng)弱的方法，即利用金納米顆粒在不同濃度的沒(méi)食子酸中生長(zhǎng)時(shí)光譜的變化作為標(biāo)準(zhǔn)參照體系，根據(jù)金納米顆粒在花茶提取液中的生長(zhǎng)過(guò)程中光譜的變化，評(píng)價(jià)和測(cè)定花茶的抗氧化能力。

本發(fā)明所述的測(cè)定花茶抗氧化能力的方法，即：

在K₂CO₃-HAuCl₄混合溶液條件下，沒(méi)食子酸介導(dǎo)金納米顆粒生長(zhǎng)。金納米顆粒在不同濃度的抗氧化劑存在下進(jìn)行生長(zhǎng)。

利用在不同濃度的沒(méi)食子酸溶液中生長(zhǎng)的金納米顆粒的光譜性質(zhì)的變化來(lái)計(jì)算抗氧化劑抗氧化能力的強(qiáng)弱。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

用花茶萃取液替換沒(méi)食子酸溶液介導(dǎo)金納米顆粒的生長(zhǎng)，觀察其光譜性質(zhì)的變化計(jì)算花茶樣品的抗氧化能力，換算成花茶所含抗氧化物質(zhì)的沒(méi)食子酸當(dāng)量。

本發(fā)明具體采用如下技術(shù)方案來(lái)解決所提出的問(wèn)題：

一種基于金納米顆粒的抗氧化劑對(duì)花茶的抗氧化能力的測(cè)定方法，步驟為：

1.K₂CO₃-HAuCl₄混合溶液的制備：將100mg的K₂CO₃溶于200mL純水中，攪拌10min，再加入3ml的1％的HAuCl₄到反應(yīng)溶液中，繼續(xù)攪拌30min，溶液由淡黃色慢慢變成無(wú)色透明。將該溶液置于4℃冰箱中保存。

2.金種子(AuNPs)的制備：向200mL4℃的預(yù)冷純水中加入3mL1％HAuCl₄，攪拌，再加入1mL?K₂CO₃(0.2mol·L-1)，最后快速加入9mL?NaBH₄(0.5mg·mL-1)，攪拌5min。將得到的酒紅色的AuNPs溶液置于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.取6mL?K₂CO₃-HAuCl₄混合溶液于反應(yīng)瓶中，置于磁力攪拌器上，均速攪拌，加入100μL的AuNPs，迅速加入600μL超純水，攪拌10分鐘后，檢測(cè)其紫外吸收峰的位置以及吸收強(qiáng)度，并記錄。以上作為空白對(duì)照。重復(fù)上述步驟，將600μL超純水分別變?yōu)闈舛葹?.2mg/mL、0.1mg/mL、0.08mg/mL、0.06mg/mL、0.04mg/mL、0.02mg/mL、0.008mg/mL、0.006mg/mL、0.004mg/mL的沒(méi)食子酸溶液。并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.花茶樣品檢測(cè)時(shí)，重復(fù)步驟3，將600μL沒(méi)食子酸溶液置換成等量的樣品萃取液，檢測(cè)后的數(shù)值帶入步驟3所得的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系，得出花茶所含抗氧化物質(zhì)的濃度，通過(guò)公式計(jì)算出該樣品中抗氧化物質(zhì)的沒(méi)食子酸當(dāng)量。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：