[發(fā)明專利]殼聚糖納米粒、防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310060936.9 | 申請日: | 2013-02-26 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103109799A | 公開(公告)日: | 2013-05-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 張必良 | 申請(專利權(quán))人: | 廣州市銳博生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào): | A01N25/10 | 分類號(hào): | A01N25/10;A01N43/90;A01P7/04 |
| 代理公司: | 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224 | 代理人: | 萬志香;曾旻輝 |
| 地址: | 510663 廣東省廣州市*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 聚糖 納米 防治 斜紋 夜蛾 生物農(nóng)藥 制劑 及其 制備 方法 | ||
1.一種殼聚糖納米粒,其特征是,其由以下重量百分比的原料組成:
殼聚糖0.5-5%、助溶劑1-10%、防凍劑0-5%、表面活性劑0.1-1%、乳化劑0.1-0.5%、緩沖液40-60%、余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼聚糖納米粒,其特征是,所述助溶劑為聚乙二醇200、聚乙二醇400、乙醇、丙二醇中的一種或者幾種混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼聚糖納米粒,其特征是,所述防凍劑為丙三醇、乙二醇、異丙醇、二甘醇中的一種或者幾種混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼聚糖納米粒,其特征是,所述表面活性劑為吐溫20、吐溫40、吐溫60、吐溫80中的一種或者幾種混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的殼聚糖納米粒,其特征是,所述乳化劑為三聚磷酸鈉、芐基二甲基酚聚氧乙烯醚、烷基苯磺酸鈣、苯乙基酚聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮聚物、苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、苯乙基聚氧乙烯醚硫酸銨鹽、烷基聯(lián)苯醚二磺酸鎂鹽中的一種或者幾種混合物;所述緩沖液為醋酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液或檸檬酸鹽緩沖液的一種或者幾種混合物。
6.一種防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑,其特征是,其主要由以下重量百分比的成分組成:
(A)0.05-15%的有效成分:針對斜紋夜蛾高效致死靶基因設(shè)計(jì)合成的siRNA,所述siRNA為15-50nt的雙鏈核糖核酸、
(B)19.95-55%溶劑、
(C)30-80%權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的殼聚糖納米粒。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑,其特征是,所述斜紋夜蛾高效致死靶基因?yàn)榧?xì)胞色素P450基因、乙酰膽堿酯酶基因、γ-氨基丁酸受體α亞基基因、蛻皮激素基因。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑,其特征是,所述siRNA為選自針對乙酰膽堿酯酶基因的雙鏈核糖核酸為SEQ?ID?NO.1及SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3及SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.6;針對蛻皮激素基因的雙鏈核糖核酸為SEQ?ID?NO.7及SEQ?ID?NO.8、SEQ?ID?NO.9及SEQ?ID?NO.10、SEQ?ID?NO.11及SEQ?ID?NO.12;針對γ-氨基丁酸受體α亞基基因的雙鏈核糖核酸為SEQ?ID?NO.13和SEQ?ID?NO.14、SEQ?ID?NO.15和SEQ?ID?NO.16、SEQ?ID?NO.17和SEQ?ID?NO.18;和針對細(xì)胞色素P450基因的雙鏈核糖核酸為SEQ?ID?NO.19及SEQ?ID?NO.20、SEQ?ID?NO.21及SEQ?ID?NO.22、SEQ?ID?NO.23和SEQ?ID?NO.24、SEQ?ID?NO.25和SEQ?ID?NO.26、SEQ?ID?NO.27和SEQ?ID?NO.28、SEQ?ID?NO.29和SEQ?ID?NO.30中的一對或多對。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8任一項(xiàng)所述的防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑,其特征是,所述溶劑為甲醇、二甲亞砜、水、Tris緩沖液中一種或者幾種混合物。
10.一種權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)所述的防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑的制備方法,其特征是,包括以下步驟:
(A)溶解:稱取所述siRNA,溶于溶劑,攪拌,使所述siRNA充分溶解,得溶液;
(B)殼聚糖納米粒制備:
1)稱取所述殼聚糖、助溶劑和防凍劑,加入到緩沖液中,攪拌使其充分溶解,得溶液1;
2)將溶液1離心,取上清,加入表面活性劑,充分?jǐn)嚢瑁靹颍萌芤?;
3)將乳化劑用水溶解后加入溶液2中,混勻即得殼聚糖納米粒;
(C)制劑制備:將步驟(A)中所得溶液與步驟(B)所得的殼聚糖納米粒混合均勻,即得所述防治斜紋夜蛾的生物農(nóng)藥制劑。
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