[發明專利]一種哈茨木霉多元發酵方法及其應用

有效

• 申請號: 201310058602.8
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103131641A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 蔣立科;魏練平;程備久;余梅
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;A01P1/00;A01P21/00;C12R1/885
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101
• 代理人: 何梅生;王偉

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體地說是一種可用于促作物提前開花、授粉和座果的哈茨木霉發酵制備方法及其應用。

背景技術

推進人們對農產品安全性認識，減少“化學肥料和有機合成農藥（含植物生長調節劑）”對生態環境的污染，已成為當代各國的共同心聲和追求的目標。隨著化學肥料和有機農藥通過農產品對人類健康產生的嚴重危害研究的深入，各國研究者正在積極尋找天然微生物肥料農藥和作物開花結果調節物質。以前人們對木霉在生長過程中促作物生長調節、改善因長期使用化肥農藥而使土壤結構破壞、污染農產品并危害人畜狀況進行研究時，根據不同利用方法可采用不同的培養方式或工藝流程，以獲得不同的產物，如里氏木霉（T.reesei）通過液體發酵可產生纖維素酶和動物源的糖蛋白，形成了一類重要的輕工業產業；在生物防治上，哈茨木霉（T.hariamum）、綠色木霉（T.Vide）、鉤狀木霉（T.hamatumi）是植物病原真菌的寄生菌或拮抗菌，可用于防治李屬樹銀葉病的木霉制劑，同時利用其分生孢子制成產品防治白絹病，灰霉病、核菌立枯病、疫病等土傳病害，被認為是以菌治菌最有希望的抗菌生物農藥，在英、德、瑞典、俄以及美國等20余個國家均已走上商品化生產。特別令人注意的是美國和俄國科技人員在1986年就發現，在木霉生物農藥和生物肥料的田間應用時，作物葉色濃郁，葉張變寬變綠，莖桿變粗壯，產量提高明顯。美國科羅拉多州大學Windharma報道，在滅菌的土壤中添加木霉菌8周后，番茄和煙草的根與幼苗的總干重比對照組份分別增加213-275%和259-318%，蘿卜的出苗率有所提高，蘿卜長勢好，前蘇聯的Buimistu也報道了木霉所產生刺激植物生長發育物質的田間試驗情況。

近年來，由我國趙培潔等在木霉生物農藥和生物肥料田間應用時也發現，許多作物使用木霉后，存在于Windharman和Buinislu所發現的類似現象。當有機物原料中植入木霉的分子和菌絲時，對肥料具有分解能力強，見效快、肥力持久等特點，而促進作物生長的物質（PGPS）主要存在于木霉液體培養基中。

發明內容

本發明的目的是提供一種哈茨木霉多元發酵方法及其應用，具體是將哈茨木霉加入不同效應物對應的培養液中生長，并合成出對作物不同生長階段所需發酵液，以提高種子發芽率、果樹坐果率、抗病害、抗逆性以及促進果樹開花期提前。

本發明實現發明目的采用如下方案：

一種哈茨木霉發酵液的制備方法，其特征在于：按如下重量比配置培養基：

馬鈴薯1-5?%、血紅蛋白0.5-3.3%、FeSO4?0.01-0.03%、KH2PO4??0.02-0.20?%、MgSO4?0.05-0.35%、CaSO4?0.05-0.1?%、ZnSO4?0.01-0.02?%，余量為水；所述培養基pH值調至5.7-6.5，然后將哈茨木霉接種在培養基中，于26-30℃±0.5℃條件下發酵培養5-10d；發酵終止后過濾分離，若發酵終止時，培養液pH大于等于4，則調pH小于等于4，靜置6-8h后經虹吸吸取上清液，對下層膠狀物過濾，濾液調至pH?6.2-6.4，得發酵液。

所述培養基按重量比由如下物質組成：馬鈴薯2-4?%、血紅蛋白2-3%、FeSO4?0.015%、KH2PO4?0.05-0.15%、MgSO4?0.05-0.35%、CaSO4?0.05-0.1?%、ZnSO4?0.01-0.02?%，余量為水。

所述培養基按重量比由如下物質組成：?馬鈴薯3?%、血紅蛋白2%、FeSO4?0.02%、KH2PO4?0.1%、MgSO₄?0.2%、CaSO_4?0.025?%、ZnSO_4?0.01?%，余量為水。

所述培養基中血紅蛋白的含量為1%，所述培養基中還含有2%幾丁質；發酵終止后，所述濾液調至pH?6.2-6.4。

所述培養基中中CaSO₄由硼酸鈉和亞硒酸鈉代替，所述硼酸鈉和亞硒酸按質量各占一半，發酵終止后，培養液pH值調節成6.2-6.4。

所述哈茨木霉為從自然界篩選或市場購得的產幾丁質酶的哈茨木霉菌株。

本發明有益效果體現在：

本發明涉及適應農作物不同生長階段所需物質可通過同一種真菌在不同效應物的誘導下進行發酵合成而獲得。確切的說，是利用哈茨木霉在不同效應物的誘導下，進行發酵合成對作物不同生長發育階段所需物質（如促進種子萌發，生長，抗逆，抗灰霉病等土壤病菌，促作物提前開花、授粉和座果），滿足人們對作物增產的需要。

附圖說明