[發(fā)明專利]一種東方百合組織培養(yǎng)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310056924.9
• 申請日: 2013-02-24
• 公開（公告）號: CN103141381A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周世永
• 申請（專利權(quán)）人: 周世永
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/06
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• 代理人: 暫無信息

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技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明屬于脫毒苗生產(chǎn)領(lǐng)域，具體地說是一種東方百合組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

東方百合（Lilium?“Oriental?Hybrids”）百合科百合屬，為多年生草本，花朵碩大,花色各異,姿態(tài)優(yōu)雅,芳香濃郁,倍受人們喜愛,近幾年的需求量急劇上升。在我國東方百合切花種植面積逐年擴(kuò)大,對于優(yōu)質(zhì)種球的需求不斷增大。我國進(jìn)行東方百合鮮切花商品生產(chǎn)的時間較短，其國產(chǎn)種球的數(shù)量和質(zhì)量還不能滿足生產(chǎn)的需要,目前國內(nèi)東方百合種球90%以上仍依靠荷蘭進(jìn)口，而且東方百合種球鮮切花生產(chǎn)技術(shù)，至今仍然是國外的方法，用來生產(chǎn)一茬切花就廢棄不用；造成生產(chǎn)成本較高，又使種球供應(yīng)完全受制于外國供應(yīng)商,使得東方百合的種植成本居高不下。

百合無毒苗生產(chǎn)需要快速、靈敏、特異的檢測方法。指示植物檢測是一種準(zhǔn)確、可靠的檢測方法，至今東方百合病毒病的檢測仍主要依靠于指示植物檢測，按照常規(guī)做法，首先必須將試管苗進(jìn)行生根培養(yǎng)，移栽成活后才能用指示植物進(jìn)行檢測，并以指示植物檢測的結(jié)果作為判斷待檢植物是否帶毒的最終依據(jù)。但這種方法費時較長，需要1年的時間才能完成，并且病毒病的癥狀表現(xiàn)易受環(huán)境因素的影響。因此需要尋找更好的東方百合脫毒組培苗的病毒快速檢測方法。

我國對百合研究工作多集中在野生種和食用上，國內(nèi)東方百合主產(chǎn)區(qū)的企業(yè)與科技單位也在試探研究東方百合種球的復(fù)壯技術(shù)，但至今利用東方百合復(fù)壯繁育成功的企業(yè)和個人很少，國產(chǎn)種球其商品性還不太被切花種植者所認(rèn)可，產(chǎn)生差距的原因如下：1.種球自身的病毒積累；2.種球在繁育過程中由于外在條件不合理運用造成種球出現(xiàn)生理上的缺撼；3.種球采收后的冷處理技術(shù)尚有缺欠。在國外有關(guān)百合栽培的研究很多,但較少涉及切花百合種球復(fù)壯技術(shù)的文獻(xiàn)報道與專利公告。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種東方百合組織培養(yǎng)方法，解決了傳統(tǒng)東方百合種球只能進(jìn)行一茬切花生產(chǎn)的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所述一種東方百合組織培養(yǎng)方法，其特征在于：按如下步驟進(jìn)行：

1.從盆栽植株或大田植株上剪取頂芽或帶腋芽莖段為外植體，經(jīng)滅菌處理，作為脫毒組培用的外植體；

2.將滅菌處理后的頂芽或帶腋芽莖段在無菌條件下，在40倍的雙筒解剖鏡下，摘出0.2～0.3mm大小的帶l～2個葉原基的莖尖，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～30天后，從莖尖誘導(dǎo)形成幼芽，再培養(yǎng)20～30天，莖不斷抽長，培養(yǎng)成約3～5節(jié)、高5～7cm的幼苗；

3.將誘導(dǎo)形成的幼苗切成約3～5mm節(jié)段；轉(zhuǎn)接到微扦插培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30～45天；

4.將微嫁接器套入微嫁接砧木的切口下方，然后將微嫁接接穗插入微嫁接砧木上端的縱切口中，最后將微嫁接砧木的切口下方的微嫁接器往上移至微嫁接砧木的切口處，將微嫁接砧木的切口和微嫁接接穗固定牢；

5.將嫁接苗接種到微嫁接培養(yǎng)基中生根培養(yǎng)，在培養(yǎng)條件下經(jīng)45～60天的培養(yǎng)，幼苗長高成約5～7cm、苗基部長出5～10根細(xì)根；

6.將生根組培苗移栽于基質(zhì)中，培育1～2個月至成苗。

7.將移栽苗定植在大田中，培育6～10個月至植株。

所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+BAO.1～1.Omg/L+NAA?O.05～0.5mg/L；

所述微扦插培養(yǎng)基：MS+BA?0.5～2.Omg/L+IAA?0.05～0.5mg/L；

所述生根培養(yǎng)基：MS+BAO.05～0.5mg/L+NAAO.01～0.1mg/L+PP₃₃₃0.1～0.5mg/L；

所述的東方百合莖尖脫毒培養(yǎng)時外植體的滅菌處理是經(jīng)75%酒精浸泡0.5～1.Omin，再用0.196升汞溶液滅菌10～15min，最后用無菌水沖洗3～5次。

所述的東方百合莖尖脫毒培養(yǎng)和脫病毒組培培養(yǎng)時各組培階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照光強(qiáng)為2500～3000Lx，光照時間為12h/d。

所述的移栽基質(zhì)由泥炭：珍珠巖：蛭石按體積比2：1：1配制而成。

本發(fā)明所述一種東方百合組織培養(yǎng)方法，其有益效果在于：東方百合脫毒苗易于在較小的空間和較短的時間內(nèi)大量繁殖，且不受季節(jié)和外界氣候的影響；所用的培養(yǎng)基、組培條件和微嫁接器適于東方百合脫毒苗的微嫁接培養(yǎng)，利于嫁接口的愈合，平均嫁接成功率超過90%，可完全滿足病毒檢測的要求；能夠用于東方百合的規(guī)模化生產(chǎn)。

具體實施方式