[發明專利]抑癌基因FBXW7在制備預防或治療乳腺腫瘤藥物中的應用、表達載體和診斷藥物

有效

• 申請號: 201310056124.7
• 申請日: 2013-02-21
• 公開（公告）號: CN103191443A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 魏光偉;王允山;張鵬舉;何秀全
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/85;C12N15/66;C12Q1/68;A61P35/00;A61P15/14
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 鄧建國

1.抑癌基因FBXW7在制備預防或治療乳腺腫瘤藥物中的應用。

2.如權利要求1所述的應用，其特征是，所述乳腺腫瘤預防或治療藥物以FBXW7基因為靶點。

3.如權利要求1所述的應用，其特征是，所述藥物為藥劑學上可接受的任何一種劑型，包括粉劑、注射劑、膠囊、片劑或口服液。

4.如權利要求1所述的應用，其特征是，所述乳腺腫瘤為腔上皮型乳腺癌A型或B型。

5.一種預防或治療乳腺腫瘤的表達載體，其特征是，它是由FBXW7基因和pcDNA3.1載體構建而成。

6.權利要求5所述的預防或治療乳腺腫瘤藥物的表達載體的制備方法，其特征是，步驟如下：

（1）獲得cDNA：全長FBXW7基因的開放閱讀框采用RT-PCR法從正常乳腺組織的總RNA中獲得，然后進行擴增，擴增所用引物為

FBXW7-cF：ttcaccatgaatcaggaactgctc

FBXW7-cR：acacctgtacttcacttgatga；

（2）將上述cDNA連接到TOPO?PCR?Blunt載體，轉化感受態細菌，在含青霉素培養LB板中培養，挑取陽性克隆培養，經測序選擇正確克隆；

（3）FBXW7表達載體的構建

抽提正確克隆的質粒，用EcoRⅠ酶切后，經1%瓊脂糖凝膠電泳分離后回收目的片段，連入線性化的pcDNA3.1載體，轉化感受態細菌，在含青霉素培養LB板中培養，挑取陽性克隆培養，經酶切和測序雙鑒定后，保存正確克隆，抽提質粒，即得。

7.一種乳腺腫瘤診斷藥物，其特征是，它至少包括一對特異性擴增FBXW7基因的引物，所述的引物由上游引物和下游引物組成，其中，所述的上游引物具有如SEQ?ID?NO.4所示的核苷酸序列，下游引物具有如SEQ?ID?NO.5所示的核苷酸序列。

8.如權利要求7所述的乳腺腫瘤診斷藥物，其特征是，所述的乳腺腫瘤診斷藥物以FBXW7基因為基礎的檢測手段，檢測手段為RT-PCR或實時定量PCR。