[發明專利]抗成纖維細胞生長因子受體的單鏈抗體

有效

• 申請號: 201310054935.3
• 申請日: 2013-02-20
• 公開（公告）號: CN103145843A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 魏星;馬歡;白楊
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;陳燕嫻

技術領域

本發明屬于抗體領域，特別涉及一個抗成纖維細胞生長因子受體的單鏈抗體。

背景技術

惡性腫瘤，自發現以后就一直成為威脅人類生命的重大病癥之一。為了克服這一世界性的重大難題，各國科學家都在付出努力。近年來，利用特異性的抗體靶向癌癥干細胞表面標記物成為治療癌癥的一個研究方向，尋找在各類癌癥干細胞表面高表達的特異性標記物，并制備出關于它們的高特異性的抗體成為這類研究的關鍵步驟。

近年來提出的腫瘤干細胞假說顛覆了關于腫瘤發生原因的傳統觀點。人們普遍公認的腫瘤的發生是基于內在遺傳物質和外在環境相互作用的結果。在細胞生長的過程中，由于遺傳物質發生突變，可能會導致原癌基因的激活，抑癌基因的沉默以及相關的凋亡基因的異常表達，從而導致細胞的生長不再受控制，從而生成腫瘤。傳統觀點一直認為這樣的變化是來自于腫瘤組織所有細胞所積累的突變，而近些年通過科研人員的研究發現，在腫瘤組織中，僅有一小部分細胞具有形成并維持腫瘤細胞生長和異質性的能力，這樣的一小部分細胞稱之為腫瘤干細胞。成纖維細胞生長因子受體2（FGFR2）是酪氨酸激酶受體中的一員，與成纖維細胞生長因子（FGFs）相互作用，調控細胞的增殖、分化等過程。而在多種癌癥細胞以及它們的癌癥干細胞中有FGFR2異常表達的例子，將它作為癌癥治療的靶點，具有研究價值。

單鏈抗體（scFv）是一種新型的基因工程融合抗體，它由完整抗體的重鏈可變區和輕鏈可變區以及連接兩者的短的柔韌的肽鏈（10～20個氨基酸）組成，分子質量非常?。?0kDa）。scFv的活性和其他抗體一樣，生物活性是由抗體輕鏈和重鏈可變區中的高變區（CDRs）特異性的基因序列決定的。scFv由于保留了完整抗體的抗原結合能力，可以利用其對特定目標蛋白的親和性，將其作為放射性核素的載體去對腫瘤進行放射診斷和治療。scFv由于自身的特點，讓它在治療應用上有一些優點：首先這種小分子可以更快的進入實體瘤和其他組織中；其次它在血液中清除的速度也更快，能夠減少對正常組織的傷害。另外，scFv可以和其他一些物質如細胞毒素蛋白、藥物以及放射性核素融合或偶聯，這樣就可以讓它對相對的特異性的靶點細胞進行作用。目前，仍未見到關于抗FGFR2單鏈抗體的報道。

發明內容

為了克服現有技術的缺點與不足，本發明的目的在于提供一種抗成纖維細胞生長因子受體的單鏈抗體。

本發明的目的通過下述技術方案實現：一種抗成纖維細胞生長因子受體的單鏈抗體，包括重鏈可變區和輕鏈可變區；

所述的重鏈可變區的氨基酸序列如下所示：

QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAR；

所述的輕鏈可變區的氨基酸序列如下所示：

SYELTQLPSVSVSPGQTARISCSGDALANQHAYWFQQRPGQAPAAVIYRDTERPSGIPERFSGSRSGTTVTLTISGVQAGDEADYYCQSAD；

編碼所述的重鏈可變區的核苷酸序列如下所示：

CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGA；

編碼所述的輕鏈可變區的核苷酸序列如下所示：