[發(fā)明專利]一種檢測林可霉素的方法及其專用試紙

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310053821.7
• 申請日: 2013-02-19
• 公開（公告）號: CN103995107A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何方洋;萬宇平;羅曉琴;孫震;馮靜;田甜;何麗霞;余厚美;徐念琴
• 申請（專利權(quán)）人: 北京勤邦生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測林可霉素的方法及其專用試紙。

背景技術(shù)

林可霉素具有抗菌和消炎作用，不法分子常在祛痘化妝品中擅自添加，從而達(dá)到快速有效消除痘痘、粉刺、痤瘡的目的，但長期使用會刺激皮膚，還會引起腎功能障礙和革蘭氏陽性菌的耐藥性增加，給人體健康造成嚴(yán)重危害。

目前，祛痘化妝品中非法添加林可霉素的檢驗(yàn)方法，類似研究多為儀器分析方法，檢測成本高、時間長，且需要多種化學(xué)試劑和專業(yè)的檢測人員，不適宜簡易條件下的快速檢測。因此針對高科技、高智能制售假劣化妝品案件給化妝品監(jiān)管工作帶來的新挑戰(zhàn)，有必要建立簡便易行的林可霉素的檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個目的是提供一種檢測林可霉素的試紙。

本發(fā)明所提供的檢測林可霉素的試紙，包括樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜和吸水墊，其依次連接；所述結(jié)合物釋放墊上包被有膠體金標(biāo)記的林可霉素特異性抗體；林可霉素特異性抗體可為林可霉素多克隆抗體或林可霉素單克隆抗體；反應(yīng)膜上包被有檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)；當(dāng)林可霉素特異性抗體為林可霉素多克隆抗體時，檢測區(qū)包被林可霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被羊抗兔抗抗體；當(dāng)林可霉素特異性抗體為林可霉素單克隆抗體時，檢測區(qū)包被林可霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠抗抗體；所述半抗原如下（圖5）：

其中，所述結(jié)合物釋放墊中有1/3-1/2區(qū)域被所述樣品吸收墊覆蓋。

所述反應(yīng)膜包被有檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)，其中所述的檢測區(qū)位于近于所述結(jié)合物釋放墊的末端的一側(cè)，所述質(zhì)控區(qū)位于遠(yuǎn)離所述結(jié)合物釋放墊的末端的一側(cè)；所述檢測區(qū)距所述結(jié)合物釋放墊的末端5-8mm，優(yōu)選為6mm；所述質(zhì)控區(qū)距所述檢測區(qū)4-7mm，優(yōu)選為5mm。

所述檢測區(qū)和所述質(zhì)控區(qū)均為與所述試紙條的長相垂直的條帶狀。

所述結(jié)合物釋放墊包被膠體金標(biāo)記的林可霉素單克隆抗體，其包被密度為0.1-0.2μg/cm²，優(yōu)選0.1μg/cm²。

所述林可霉素單克隆抗體為由保藏號為CGMCC?No.6508的林可霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株F-1-4分泌產(chǎn)生的抗體；所述抗抗體可為羊抗鼠IgG；所述載體蛋白可為卵血清蛋白、人血清白蛋白、牛血清白蛋白、血藍(lán)蛋白或甲狀腺蛋白等。

所述試紙中包括底板，所述樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜和吸水墊黏貼在所述底板上。

所述試紙具體可為條狀；為了便于使用，所述條狀的試紙可以覆蓋有保護(hù)膜或裝在盒內(nèi)。

所述保護(hù)膜可以覆蓋所述試紙的兩端（樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊和吸水墊）

所述盒由底座和蓋構(gòu)成，底坐和蓋通過卡齒和卡孔相連接；所述底座上有與所述蓋連接的卡齒和與所述試紙相匹配的凹槽；所述蓋上有加樣孔、觀察窗和與底座卡齒相配的卡孔，所述加樣孔的位置與所述樣品吸收墊的位置相對應(yīng)，所述觀察窗與所述反應(yīng)膜上的檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)相對應(yīng)；所述試紙位于所述凹槽內(nèi)；所述觀察窗上印有T和C，T表示檢測線，在靠近所述加樣孔側(cè)，C表示質(zhì)控線，在遠(yuǎn)離所述加樣孔側(cè)。

底板可由不吸水的韌性材料制成，如硬質(zhì)塑料、不吸水硬紙，具體可為PVC板材；樣品吸收墊可由玻璃纖維棉、聚酯材料（聚酯絲或聚酯棉）、尼龍膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜制成；結(jié)合物釋放墊可由玻璃纖維制成；吸水墊可為吸濾紙或慮油紙；反應(yīng)膜可為硝酸纖維素膜或?yàn)榧兝w維素膜；所述保護(hù)膜可為PE材質(zhì)的保護(hù)膜。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種制備上述試紙的方法。

本發(fā)明所提供的制備上述試紙的方法，是將樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜和吸水墊依次連接；所述結(jié)合物釋放墊上包被有膠體金標(biāo)記的林可霉素特異性抗體；所述林可霉素特異性抗體為林可霉素多克隆抗體或林可霉素單克隆抗體；所述反應(yīng)膜上包括檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測區(qū)包被有半抗原和載體蛋白的偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被有抗抗體；

所述樣品吸收墊在進(jìn)行所述連接前，先在如下溶液中浸泡1-3h，再進(jìn)行干燥：含0.3-0.5%（體積百分含量）牛血清蛋白、pH值為9.6-10.0、0.1-0.2mol/L的碳酸鹽緩沖液；

所述包被有膠體金標(biāo)記的林可霉素特異性抗體的結(jié)合物釋放墊是按照如下方法制備的：將包被前的結(jié)合物釋放墊先在如下溶液中浸泡20-40秒，干燥，再進(jìn)行所述膠體金標(biāo)記的林可霉素特異性抗體包被：含有0.8-1.2％（體積百分含量）牛血清白蛋白、pH值為7.0-7.4、0.1-0.2mol/L磷酸緩沖液。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種檢測林可霉素的方法。