[發明專利]一種甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒在制備治療過敏性哮喘藥物中應用

無效

• 申請號: 201310053559.6
• 申請日: 2013-02-19
• 公開（公告）號: CN103110959A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 王彥;王長征;林科雄;程曉明
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三軍醫大學第二附屬醫院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/36;A61P11/06;A61P37/08
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

1.一種甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒在制備治療過敏性哮喘藥物中應用，其特征在于，所述甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒作為唯一有效成分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應用。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒在制備減輕哮喘氣道炎癥藥物中的應用。

3.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒在制備降低哮喘血清中過敏原特異性IgE和支氣管肺泡灌洗液中白細胞介素-4和白細胞介素-5藥物中的應用。

4.一種甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于，包括：

步驟1、制備甘油二酯激酶α質粒：全基因合成小鼠白細胞介素-2信號肽序列和小鼠甘油二酯激酶α基因的融合基因，克隆到pEGFP-N3載體而制備得甘油二酯激酶α質粒；

步驟2、將殼聚糖溶解于1％醋酸水溶液，配制成濃度為0.5～2.5mg/ml的殼聚糖醋酸溶液，用NaOH將其pH值調節在5.5～5.7之間，無菌膜過濾，其中所述殼聚糖的分子量在2～60萬道爾頓之間，其脫乙酰度在90％～95％之間，所述無菌膜的孔徑為0.22μm；

步驟3、將所述甘油二酯激酶α質粒溶解在濃度為10～25mM的經孔徑為0.22μm的無菌膜過濾的無水硫酸鈉溶液中，制備得濃度在100～360μg/ml之間的甘油二酯激酶α質粒溶液。其中，步驟2中所述殼聚糖醋酸溶液中的氨基摩爾數與所述甘油二酯激酶α溶液中的磷酸酯基摩爾數之比≥5；

步驟4、所述的甘油二酯激酶α質粒溶液和所述殼聚糖醋酸溶液在溫度在55℃～57℃之間的水浴中加熱10～15min；

步驟5、在漩渦震蕩的條件下，按體積比1∶1的比例，將經水浴加熱后的所述甘油二酯激酶α溶液緩慢勻速加入到經水浴加熱后的所述殼聚糖醋酸溶液中，旋渦振蕩30～60s，室溫靜置，既得甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒溶液。

5.如權利要求4所述的甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于，所述步驟5中的甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒溶液的保存溫度為4℃。

6.如權利要求4所述的甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于，本方法制備得的甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒溶液中的甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒的粒徑在150nm～500nm之間，其中粒徑在150nm～300nm之間的甘油二酯激酶α基因-殼聚糖納米粒占60％以上。