[發明專利]底物蛋白SNVP及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201310053556.2
• 申請日: 2013-02-19
• 公開（公告）號: CN103145850A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 王慧;李濤;羅森;王琴;房華麗;韓燃
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/13;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N7/01;C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.蛋白質，是如下（a）或（b）：

（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

（b）將序列2的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加，且與肉毒毒素檢測相關的由序列2衍生的蛋白質。

2.編碼權利要求1所述蛋白質的核酸分子。

3.根據權利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子為編碼權利要求1所述蛋白質的基因；所述基因是如下1）或2）所述的DNA分子：

1）編碼序列為序列表中序列1的DNA分子；

2）序列表中序列1所示的DNA分子。

4.下述a）-e）中的任一種生物材料：

a）含有權利要求2或3所述核酸分子的重組載體；

b）含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒；

c）含有權利要求2或3所述核酸分子的重組細胞；

d）含有權利要求2或3所述核酸分子的重組菌；

e）含有權利要求2或3所述核酸分子的重組病毒。

5.根據權利要求4所述的生物材料，其特征在于：所述重組載體為重組表達載體或重組克隆載體。

6.根據權利要求5所述的生物材料，其特征在于：在所述重組表達載體中，啟動所述基因轉錄的啟動子為T7啟動子。

7.如下I）或II）的應用：

I）權利要求1所述蛋白質在作為梭菌屬神經毒素底物中的應用；

II）權利要求1所述蛋白質，或權利要求2或3所述核酸分子，或權利要求4-6中任一所述的生物材料在制備檢測梭菌屬神經毒素的產品中的應用。

8.用于檢測梭菌屬神經毒素的產品，其活性成分為權利要求1所述蛋白質，或權利要求2或3所述核酸分子，或權利要求4-6中任一所述生物材料。

9.檢測待測樣品中是否含有梭菌屬神經毒素，以及含有哪種梭菌屬神經毒素的方法，包括如下步驟：

（1）將權利要求1所述的蛋白質與待測樣品進行反應；

（2）根據反應產物的大小，按照如下方法確定所述待測樣品中是否含有梭菌屬神經毒素，以及含有哪種梭菌屬神經毒素：

若滿足（a1）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有A型肉毒毒素；

若滿足（a2）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有B型肉毒毒素或破傷風毒素；

若滿足（a3）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有C型肉毒毒素；

若滿足（a4）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有D型肉毒毒素；

若滿足（a5）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有E型肉毒毒素；

若滿足（a6）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有F型肉毒毒素；

若滿足（a7）的條件，則所述待測樣品中含有或候選含有G型肉毒毒素；

若同時不滿足（a1）-（a7）的條件，則所述待測樣品中不含有或候選不含有梭菌屬神經毒素；

（a1）反應產物中含有大小為22.41KDa和/或13.10KDa的蛋白質；

（a2）反應產物中含有大小為32.15KDa和/或3.36KDa的蛋白質；

（a3）反應產物中含有大小為22.57KDa和/或12.94KDa的蛋白質；

（a4）反應產物中含有大小為30.40KDa和/或5.10KDa的蛋白質；

（a5）反應產物中含有大小為20.46KDa和/或15.04KDa的蛋白質；

（a6）反應產物中含有大小為30.28KDa和/或5.23KDa的蛋白質；

（a7）反應產物中含有大小為32.68KDa和/或2.82KDa的蛋白質。

10.權利要求1所述蛋白質的制備方法，包括如下步驟：將權利要求1所述的蛋白質的編碼基因在生物細胞中進行表達得到權利要求1所述蛋白質；所述生物細胞為微生物細胞、非人動物細胞或植物細胞；

所述蛋白質的編碼基因的核苷酸序列具體如序列表中序列1所示。