[發明專利]分離的多肽及其應用

無效

• 申請號: 201310051280.4
• 申請日: 2013-02-16
• 公開（公告）號: CN103319574A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 施一公;顏寧;鄧東;殷平;嚴創業
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C07K14/195
• 分類號: C07K14/195;C12N15/31;C12N15/63;C12N15/70;C12R1/64
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發明涉及生物技術領域，更具體的，本發明涉及分離的多肽及其應用。?

背景技術

TALEs（Transcription?Activator?Like?Effectors，轉錄激活子樣效應因子）主要存在于植物致病菌（Xanthomonas）。當病原菌侵染植株時，病菌會通過其自身的III型分泌系統將包括TALE在內的一系列效應分子注入到植物細胞內。這些效應分子通過影響宿主細胞的信號傳遞，基因表達等方式來協助病菌進一步擴增。TALE則是這些效應分子蛋白中最大的一類，它類似植物的轉錄激活子一樣行使功能。?

然而，目前關于TALE的研究仍有待改進。?

發明內容

本發明旨在至少在一定程度上解決上述技術問題之一或至少提供一種有用的商業選擇。為此，本發明的一個目的在于提出一種具有能夠有效地統一性識別DNA堿基的多肽。?

在本發明的第一方面，本發明提出了一種分離的多肽，其特征在于，所述多肽包含：?

多個重復氨基酸序列，所述重復氨基酸序列為：LTPDQVVAIASX₁X₂GGKQALETVQRLLPVLCQAHG，?

其中，?

X₁為H或N，?

X₂為選自I、L、M、W、C、T、P、H、S、N、E、Q、H、K和R的之一。?

發明人發現該多肽能夠有效地特異性識別堿基。具體地，通過改變X₁X₂的氨基酸殘基類型，可以改變所識別的堿基。具體的，總結如下表1所示：?

表1?

需要說明的是，在本文中采用單個英文字母表示氨基酸，具體代表如下：A，丙氨酸；C，半胱氨酸；D，天冬氨酸；E，谷氨酸；F，苯丙氨酸；G，甘氨酸；H，組氨酸；I，異亮氨酸；K，賴氨酸；L，亮氨酸；M，甲硫氨酸；N，天冬酰胺；P，脯氨酸；Q，谷氨酰胺；R，精氨酸；S，絲氨酸；T，蘇氨酸；V，丙氨酸；W，色氨酸；Y，絡氨酸。?

根據本發明的實施例，上述多肽還可以具有下列附加技術特征：?

根據本發明的一個實施例，所述多肽可以包含至少10個所述重復氨基酸序列。優選地，所述多肽包含20個所述重復氨基酸序列。由此，可以進一步提高所述多肽特異性識別堿基的效率。?

根據本發明的一個實施例，所述多肽可以進一步包括：DNA修飾酶區域結構域。由此，可以在多肽識別堿基之后，對DNA序列進行修飾。?

在本發明的第二方面，本發明提出了一種分離的寡核苷酸。根據本發明的實施例，所述寡核苷酸編碼可以編碼前面所述的多肽。優選地，所述寡核苷酸的序列為選自下面序列的至少一種：?

CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTAATTCTGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA（SEQ?ID?NO：1），?

CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTAATACAGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA（SEQ?ID?NO：2），?

CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTCATACAGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA（SEQ?ID?NO：3），?

CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTAATCATGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA（SEQ?ID?NO：4），?

CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTCATTACGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA（SEQ?ID?NO：5），?