[發(fā)明專利]一株提高丹參產(chǎn)量及總酚酸含量的鏈格孢屬真菌

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310050774.0
• 申請日: 2013-02-16
• 公開（公告）號: CN103992951A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭順星;唐坤;王春蘭;李標(biāo);陳曉梅
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P21/00;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一株提高丹參產(chǎn)量和有效成分含量的真菌。?

背景技術(shù)

藥用丹參為唇形科植物丹參(Salvia?miltiorrhiza?Bge.)的干燥根及根莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，位居上品，具有活血、涼血、清心除煩的功效，臨床上廣泛用于冠心病的治療。丹參制劑也是我國心腦血管病的基本治療藥物。因療效確切，丹參已成為我國用量大，銷售額多的中藥。?

丹酚酸類成分是丹參的水溶性成分，對心、腦、肝、腎、胃等多個(gè)器官具有保護(hù)作用。丹酚酸B是其中的主要成分和活性成分，在心臟保護(hù)、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗肝纖維化、腦保護(hù)等方面都有顯著的藥理活性，被廣泛地用于臨床。?

內(nèi)生真菌是指那些在其生活史的全部或某一時(shí)期生活在植物組織內(nèi)，沒有引起植物組織明顯病害癥狀的真菌。研究發(fā)現(xiàn)，幾乎所有健康植物的組織器官內(nèi)都有內(nèi)生真菌的存在。內(nèi)生真菌與植物共生不僅可以提高植物對高溫、干旱、鹽化、病原菌等逆境脅迫的適應(yīng)能力，還可以提高藥用植物有效成分的含量，從而提高藥材品質(zhì)。內(nèi)生真菌的這些作用對藥用植物資源的開發(fā)與保護(hù)，以及對藥用植物有效成分的積累等有著重要的意義。?

本發(fā)明利用生物技術(shù)，從丹參中分離、篩選出能夠提高丹參總酚酸含量的內(nèi)生真菌；將菌株用于丹參的栽培中，實(shí)現(xiàn)提高收獲期丹參產(chǎn)量，以及提高丹參總酚酸、丹酚酸A和丹酚酸B含量的目的。該發(fā)明對丹參資源的開發(fā)與保護(hù)、丹參中酚酸類成分的應(yīng)用生產(chǎn)等都有著重要的意義。該技術(shù)方法操作簡單，綠色環(huán)保，具有廣泛的應(yīng)用前景，目前國內(nèi)外尚未見利用真菌與丹參共生栽培，提高丹參藥材產(chǎn)量和酚酸類成分含量的研究報(bào)道。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，為丹參的人工栽培提供一株能提高丹參產(chǎn)量及酚酸類成分含量的菌株。菌株名稱為11775-42-Z1，以下簡稱42#，經(jīng)鑒定為鏈格孢(Alternaria?sp.)。該菌株2012年07月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏號CGMCC?No.6380。菌株42#是一株丹參的內(nèi)生真菌，經(jīng)與丹參幼苗共生栽培4-6月后，與相同栽培環(huán)境下未接菌的丹參相比，能提高丹參藥材產(chǎn)量和酚酸類成分含量。?

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取如下的技術(shù)：?

(1)42#的固體培養(yǎng)：培養(yǎng)基組成按重量比計(jì)算為：麥麩：10％-17％，木屑：15％-17％，KH₂PO₄：0.2％-0.3％，MgSO₄：0.1％-0.2％，CaSO₄：0.07％-0.10％，葡萄糖：1.40％-2.20％，玉米芯：2.00％-4.00％，玉米碎顆粒：3.00％-5.00％，其余成分為水。稱取各種組分，混勻后分裝，122℃滅菌140min，放涼備用。取在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)的42#菌片，放置在固體培養(yǎng)基的中部，25℃暗室培養(yǎng)至42#菌長至瓶中培養(yǎng)基的2/3處即可使用。?

(2)菌苗共生栽培：春季栽培丹參時(shí)，取出芽后20-30天的丹參苗，在每株丹參幼苗根部分別施予固體培養(yǎng)的42#菌材0.5-1.5g，用土覆蓋后栽于溫室內(nèi)或大田里，常規(guī)方法進(jìn)行種植管理。?

(3)菌株42#經(jīng)與丹參幼苗共生栽培4-6月后，與相同栽培環(huán)境下未接菌的丹參相比，丹參干重，以及總酚酸、丹酚酸A和丹酚酸B的含量均有不同程度的提高。?

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1?

42#的固體培養(yǎng)：麥麩：100g，木屑：150g，KH₂PO₄：2g，MgSO₄：1g，CaSO₄：0.7g，葡萄糖：14g，玉米芯：20g，玉米碎顆粒：30g，加水混合均勻，分裝于瓶內(nèi)，122℃滅菌140min，放涼備用。取在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)的42#菌片，放置在固體培養(yǎng)基的中部，25℃暗室培養(yǎng)至42#菌長至瓶中培養(yǎng)基的2/3處即可使用。?

菌苗共生栽培：用溫室盆栽的方法，在春季栽培丹參時(shí)，取出芽后20-30天的丹參苗，在每株丹參幼苗根部分別施予固體培養(yǎng)的42#菌材0.5g，每盆1株，用土覆蓋后盆栽于溫室里，常規(guī)方法進(jìn)行種植管理，6個(gè)月后收獲。?