[發明專利]一種控制魚類生殖的方法

有效

• 申請號: 201310049161.5
• 申請日: 2013-02-07
• 公開（公告）號: CN103088066A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 胡煒;張運生;戴軍;朱作言
• 申請（專利權）人: 中國科學院水生生物研究所
• 主分類號: C12N15/89
• 分類號: C12N15/89;A01K67/027
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種控制魚類生殖的方法，其步驟是：

（1）外源基因導入：采用顯微注射法將重組基因CMV-eGFP-SV40-CMV-Gal4-SV40和CMV-RFP-SV40-UAS-antisense?dnd分別導入斑馬魚受精卵中，得到P0代轉GAL4基因斑馬魚和轉UAS-antisense?dnd基因斑馬魚；

所述的重組基因CMV-eGFP-SV40-CMV-Gal4-SV40，其序列為SEQ?ID?NO.1所示；

所述的重組基因CMV-RFP-SV40-UAS-antisense?dnd，其序列為SEQ?ID?NO.2所示；

（2）獲得轉基因魚純合子：表達綠色熒光蛋白的為P0代轉GAL4基因斑馬魚；表達紅色熒光蛋白的為P0代轉UAS-antisense?dnd基因斑馬魚；將兩種P0代轉基因斑馬魚分別與對照斑馬魚雜交，分別獲得F1代轉GAL4基因斑馬魚和轉UAS-antisense?dnd基因斑馬魚；將F1代轉基因GAL4斑馬魚自交，在F2代中獲得轉GAL4基因斑馬魚純合子；將F1代轉UAS-antisense?dnd基因斑馬魚自交，在F2代中獲得轉UAS-antisense?dnd基因斑馬魚純合子；

（3）轉基因魚雜交：以轉GAL4基因斑馬魚純合子和轉UAS-antisense?dnd基因斑馬魚純合子為親本，進行兩個家系的轉基因魚雜交，兩個家系雜交產生的后代魚生殖敗育。