[發(fā)明專利]一種維生素B12的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310046879.9
• 申請日: 2010-02-05
• 公開（公告）號: CN103103235A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發(fā)明（設計）人: 馮勝利;牛瑞昕
• 申請（專利權）人: 馮勝利
• 主分類號: C12P19/42
• 分類號: C12P19/42
• 代理公司: 北京神州華茂知識產(chǎn)權有限公司 11358
• 代理人: 吳照幸

本申請是“一種維生素B12的制備方法”的分案申請，原申請的申請?zhí)柺?01010106076.4，申請日是20100205，發(fā)明創(chuàng)造名稱是“一種維生素B12的制備方法”。

發(fā)明領域

本發(fā)明涉及一種發(fā)酵法制備維生素B12的方法，具體地說，涉及一種維生素B12的提取方法。

背景技術

維生素B12(Vitamin?B12)又稱氰鈷胺素(Cyanocobalamin)，也稱為動物蛋白因子，是一類含有類似氰鈷胺素維生素活性物質的總稱。它是唯一含有金屬離子的水溶性維生素，又是人體必需的維生素之一。

維生素B12的分子式為C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P，其熔點很高(320℃時不熔)，無臭無味，極易吸潮，晶體吸水后在空氣中穩(wěn)定。維生素B12溶于水，難溶于乙醇，不溶于丙酮、氯仿和乙醚，遇強光可分解，在210～220℃高溫下會變色，在強酸性或強堿性環(huán)境中可分解。

維生素B12是比較特殊的一種維生素，大多數(shù)植物性食品中不含維生素B12，主要存在于動物組織中。維生素B12是人體組織代謝過程中必需的維生素，是人和其它哺乳動物維持生長和促進紅細胞生長的重要因子，具有廣泛的生理作用，如參與體內甲基轉換及葉酸代謝，促進神經(jīng)髓鞘中脂蛋白的形成，保持中樞神經(jīng)和外周髓鞘神經(jīng)纖維的功能完整。臨床上用于治療惡性貧血和恢復造血功能，也用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如多發(fā)性神經(jīng)炎、末梢神經(jīng)麻痹等。

總之，維生素B12是一種人體必需的維生素，其生理功能及營養(yǎng)作用正日漸引起全社會的普遍關注。目前我國維生素B12的應用面較窄，主要是醫(yī)藥用。在國外，維生素B12除用于醫(yī)藥方面(約占全部消費量40％左右)以外，還大量應用于營養(yǎng)補充劑和食品加工方面(約占全部消費量的24％左右)，如維生素口服液、維生素強化面粉、嬰兒食品等。因此我國的維生素B12應用于食品行業(yè)相關產(chǎn)品的市場發(fā)展空間很大，可以借鑒發(fā)達國家的經(jīng)驗，開發(fā)添加維生素B12等多種維生素的營養(yǎng)食品、保健食品等，這樣既能改善人們的營養(yǎng)狀況和提高人們的身體素質，又能促進維生素B12相關食品行業(yè)的發(fā)展與進步。

雖然Woodward已于1973年以非常出色的工作完成了Vitamin?B12的全化學合成，但目前工業(yè)上仍然主要是利用細菌培養(yǎng)液發(fā)酵生產(chǎn)維生素B12。以謝氏丙酸桿菌的厭氧發(fā)酵工藝為例，其基本提取流程如下：

目前，發(fā)酵法生產(chǎn)維生素B12的研究重點主要集中在菌株的選育、優(yōu)化以及發(fā)酵工藝、設備的改進等方面。

如專利WO2003018826“制備維生素B12的方法”公開了一種用巨大芽孢桿菌制備維生素B12的方法，主要涉及厭氧條件下巨大芽孢桿菌的發(fā)酵工藝。

專利CN200510119016.5“酶催化生產(chǎn)腺苷輔酶維生素B12的方法”公開了一種酶催化生產(chǎn)腺苷輔酶維生素B12的方法：利用三磷酸腺苷--維生素B12腺苷轉移酶生產(chǎn)腺苷輔酶維生素B12，其中的羥鈷型維生素B12使用的終濃度為0.001-0.05mol/l。該方法具有工藝簡潔、生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)成本低的特點。利用本發(fā)明中的生產(chǎn)工藝獲得的終產(chǎn)物腺苷輔酶維生素B12純度高、穩(wěn)定性強，可加工成多種劑型，為藥用腺苷輔酶維生素B12的大規(guī)模生產(chǎn)提供了一條新途徑。

Nakano等人(Nakano?K，Kataoka?H，M?atsum?ura?M.High?density?culture?of?Propionibacterium?freudenreichii?coupled?with?propionic?acid?removal?system?with?activated?charcoal[J].Ferment?Bioeng，1996，81(1)：37-41.)建立了由旋轉陶瓷膜濾器、活性炭填裝柱和發(fā)酵罐組成的發(fā)酵體系。膜濾器和活性炭填裝柱可用于去除丙酸和回收重復使用的發(fā)酵細胞和培養(yǎng)基，菲氏丙酸桿菌在發(fā)酵罐內的發(fā)酵液先經(jīng)旋轉陶瓷膜過濾，濾液再進入裝填柱，最終的透過液里已不再含有丙酸，可以循環(huán)回到發(fā)酵罐中重復使用，丙酸和乙酸也可回收成為副產(chǎn)品。與傳統(tǒng)的發(fā)酵法相比，菲氏丙酸桿菌和糖類等營養(yǎng)物質的利用率都大大提高了，減少了基質的浪費，可進一步降低成本，有利于實際生產(chǎn)的應用和推廣。