[發明專利]一種維生素B12的制備方法

有效

• 申請號: 201310046879.9
• 申請日: 2010-02-05
• 公開（公告）號: CN103103235A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 馮勝利;牛瑞昕
• 申請（專利權）人: 馮勝利
• 主分類號: C12P19/42
• 分類號: C12P19/42
• 代理公司: 北京神州華茂知識產權有限公司 11358
• 代理人: 吳照幸

本申請是“一種維生素B12的制備方法”的分案申請，原申請的申請號是201010106076.4，申請日是20100205，發明創造名稱是“一種維生素B12的制備方法”。

發明領域

本發明涉及一種發酵法制備維生素B12的方法，具體地說，涉及一種維生素B12的提取方法。

背景技術

維生素B12(Vitamin?B12)又稱氰鈷胺素(Cyanocobalamin)，也稱為動物蛋白因子，是一類含有類似氰鈷胺素維生素活性物質的總稱。它是唯一含有金屬離子的水溶性維生素，又是人體必需的維生素之一。

維生素B12的分子式為C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P，其熔點很高(320℃時不熔)，無臭無味，極易吸潮，晶體吸水后在空氣中穩定。維生素B12溶于水，難溶于乙醇，不溶于丙酮、氯仿和乙醚，遇強光可分解，在210～220℃高溫下會變色，在強酸性或強堿性環境中可分解。

維生素B12是比較特殊的一種維生素，大多數植物性食品中不含維生素B12，主要存在于動物組織中。維生素B12是人體組織代謝過程中必需的維生素，是人和其它哺乳動物維持生長和促進紅細胞生長的重要因子，具有廣泛的生理作用，如參與體內甲基轉換及葉酸代謝，促進神經髓鞘中脂蛋白的形成，保持中樞神經和外周髓鞘神經纖維的功能完整。臨床上用于治療惡性貧血和恢復造血功能，也用于神經系統疾病如多發性神經炎、末梢神經麻痹等。

總之，維生素B12是一種人體必需的維生素，其生理功能及營養作用正日漸引起全社會的普遍關注。目前我國維生素B12的應用面較窄，主要是醫藥用。在國外，維生素B12除用于醫藥方面(約占全部消費量40％左右)以外，還大量應用于營養補充劑和食品加工方面(約占全部消費量的24％左右)，如維生素口服液、維生素強化面粉、嬰兒食品等。因此我國的維生素B12應用于食品行業相關產品的市場發展空間很大，可以借鑒發達國家的經驗，開發添加維生素B12等多種維生素的營養食品、保健食品等，這樣既能改善人們的營養狀況和提高人們的身體素質，又能促進維生素B12相關食品行業的發展與進步。

雖然Woodward已于1973年以非常出色的工作完成了Vitamin?B12的全化學合成，但目前工業上仍然主要是利用細菌培養液發酵生產維生素B12。以謝氏丙酸桿菌的厭氧發酵工藝為例，其基本提取流程如下：

目前，發酵法生產維生素B12的研究重點主要集中在菌株的選育、優化以及發酵工藝、設備的改進等方面。

如專利WO2003018826“制備維生素B12的方法”公開了一種用巨大芽孢桿菌制備維生素B12的方法，主要涉及厭氧條件下巨大芽孢桿菌的發酵工藝。

專利CN200510119016.5“酶催化生產腺苷輔酶維生素B12的方法”公開了一種酶催化生產腺苷輔酶維生素B12的方法：利用三磷酸腺苷--維生素B12腺苷轉移酶生產腺苷輔酶維生素B12，其中的羥鈷型維生素B12使用的終濃度為0.001-0.05mol/l。該方法具有工藝簡潔、生產周期短、生產成本低的特點。利用本發明中的生產工藝獲得的終產物腺苷輔酶維生素B12純度高、穩定性強，可加工成多種劑型，為藥用腺苷輔酶維生素B12的大規模生產提供了一條新途徑。

Nakano等人(Nakano?K，Kataoka?H，M?atsum?ura?M.High?density?culture?of?Propionibacterium?freudenreichii?coupled?with?propionic?acid?removal?system?with?activated?charcoal[J].Ferment?Bioeng，1996，81(1)：37-41.)建立了由旋轉陶瓷膜濾器、活性炭填裝柱和發酵罐組成的發酵體系。膜濾器和活性炭填裝柱可用于去除丙酸和回收重復使用的發酵細胞和培養基，菲氏丙酸桿菌在發酵罐內的發酵液先經旋轉陶瓷膜過濾，濾液再進入裝填柱，最終的透過液里已不再含有丙酸，可以循環回到發酵罐中重復使用，丙酸和乙酸也可回收成為副產品。與傳統的發酵法相比，菲氏丙酸桿菌和糖類等營養物質的利用率都大大提高了，減少了基質的浪費，可進一步降低成本，有利于實際生產的應用和推廣。