[發(fā)明專利]在沙蠶體內(nèi)人工定植功能性細(xì)菌菌群的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310046440.6
• 申請日: 2013-02-06
• 公開（公告）號: CN103098763A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周一兵;楊大佐;王斌;何潔;劉海映
• 申請（專利權(quán)）人: 大連海洋大學(xué)
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033;A23K1/18;A23K1/00
• 代理公司: 大連非凡專利事務(wù)所 21220
• 代理人: 田和穗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種定植細(xì)菌的方法，特別是一種在沙蠶體內(nèi)人工定植功能性細(xì)菌菌群的方法。

背景技術(shù)

菌的定植是指各種微生物（細(xì)菌）經(jīng)常從不同環(huán)境落到生物體，并能在一定部位定居和不斷生長、繁殖后代，這種現(xiàn)象通常稱為“細(xì)菌定植”。目前，國內(nèi)外關(guān)于細(xì)菌定值的研究多集中于人體和大型陸生脊椎動物中，海洋無脊椎動物特別是海洋底棲動物的細(xì)菌定值研究未見報道。通過將對人類有益的功能性細(xì)菌定植于底內(nèi)棲息的多毛類動物身體中，利用多毛類動物沙蠶的挖洞棲息功能，可將功能性細(xì)菌帶入海底，進(jìn)而修復(fù)污染的海洋沉積質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述不足，提出一種能夠在沙蠶體內(nèi)進(jìn)行人工定植功能性細(xì)菌菌群，將這類功能性細(xì)菌菌群帶入海底，以其進(jìn)行海底污染修復(fù)的方法。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：一種在沙蠶體內(nèi)人工定植功能性細(xì)菌菌群的方法，其特征在于：所述的方法包括一下步驟：

a、人工培育大規(guī)格沙蠶苗種，苗種規(guī)格達(dá)1cm以上，

b、經(jīng)篩選、分離、搖瓶、發(fā)酵步驟獲得高密度功能性細(xì)菌菌群，

c、將細(xì)菌菌群和水按照1:1-5的比例進(jìn)行稀釋，然后與粉狀飼料、液態(tài)細(xì)菌葡萄糖培養(yǎng)基進(jìn)行混合，粉狀飼料與細(xì)菌菌群稀釋液的質(zhì)量比為1.5-2:1，液態(tài)細(xì)菌葡萄糖培養(yǎng)基是細(xì)菌菌群稀釋液體積的10-20%，

d、取上述的混合物投喂沙蠶苗種，日投喂量為沙蠶苗種體重的10%。

所述的菌群為石油降解菌菌群、硝化細(xì)菌菌群、反硝化細(xì)菌菌群、EM菌菌群中的一種。

所述的沙蠶為雙齒圍沙蠶、日本刺沙蠶、多齒圍沙蠶中的一種。

本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點：

本種方法，能夠成功的將漂浮的有益細(xì)菌菌群定植于海洋多毛類動物體內(nèi)，通過這種多毛類動物的正常生命活動，將原本漂浮在海面的有益細(xì)菌帶入海底，通過多毛類動物（沙蠶）的攝食、排泄、挖洞等活動，讓有益菌完全棲息于海底，由于植入的細(xì)菌為功能性的細(xì)菌菌群，因此能夠?qū)崿F(xiàn)海洋污染修復(fù)等功能和效果。所以可以說這種方法具備了廣泛的市場前景，十分有利于在本領(lǐng)域中推廣應(yīng)用。

具體實施方式

下面將說明本發(fā)明的具體實施方式。

實施例一

采用人工育苗的方法培育大規(guī)格雙齒圍沙蠶沙蠶苗種，并通過中間育成，獲得體長達(dá)達(dá)1cm以上的雙齒圍沙蠶大規(guī)格苗種。通過篩選、分離、搖瓶、發(fā)酵等步驟獲得高密度功能性石油降解菌。將獲得的石油降解菌與海水按照1:1-5比例進(jìn)行稀釋，并混入混合海水10%體積的葡萄糖，同時與市售的海參苗粉狀配合飼料進(jìn)行混合，按照粉狀飼料與細(xì)菌菌群稀釋液的質(zhì)量比為1.5-2:1進(jìn)行混合，制成混合塊狀混合餌料，利用混合飼料投喂雙齒圍沙蠶苗種，其日投喂量為沙蠶體重的10%。經(jīng)過1周的投喂飼養(yǎng)以后，采用隨機(jī)取樣的方法，挖取雙齒圍沙蠶，并解剖沙蠶腸道，取腸道內(nèi)容物，經(jīng)過常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)后，獲得石油降解菌優(yōu)勢菌群并與原定植菌群進(jìn)行對比，證明石油降解菌優(yōu)勢菌群已經(jīng)成功植入雙齒圍沙蠶體內(nèi)。

實施例二

采用人工育苗的方法培育大規(guī)格日本刺沙蠶苗種，并通過中間育成，獲得體長達(dá)達(dá)1cm以上的日本刺沙蠶大規(guī)格苗種。通過篩選、分離、搖瓶、發(fā)酵等步驟獲得海水硝化細(xì)菌。將獲得的硝化細(xì)菌與海水按照1:5比例進(jìn)行稀釋，并混入混合海水10%體積的葡萄糖，同時與市售的對蝦幼體粉狀配合飼料進(jìn)行混合，按照粉狀飼料與細(xì)菌菌群稀釋液的質(zhì)量比為1.5-2:1進(jìn)行混合，制成混合塊狀混合餌料，將混合飼料投喂日本刺沙蠶苗種，其日投喂量為沙蠶體重的10%。經(jīng)過1周的投喂飼養(yǎng)以后，采用隨機(jī)取樣的方法，挖取日本刺沙蠶，并解剖沙蠶腸道，取腸道內(nèi)容物，經(jīng)過常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)后，獲得硝化細(xì)菌優(yōu)勢菌群并與原定植菌群進(jìn)行對比，，證明海水硝化細(xì)菌已經(jīng)成功植入日本刺沙蠶體內(nèi)。