[發明專利]用于原代培養腫瘤細胞的細胞培養組合物及用途

有效

• 申請號: 201310045008.5
• 申請日: 2013-02-05
• 公開（公告）號: CN103966167B
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 高全立
• 申請（專利權）人: 高全立
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司11112
• 代理人: 丁業平,張天舒

1.一種細胞培養組合物在上皮來源的腫瘤細胞原代培養中的用途，其中所述的細胞培養組合物包含角質細胞無血清培養基和神經細胞培養用無血清添加劑，并且所述的細胞培養組合物中不包含血清；

其中，所述的角質細胞無血清培養基為選自角質細胞培養基II(Keratinocyte Medium II)、角質細胞無血清培養基(keratinocyte-SFM)以及成分確定的角質細胞無血清培養基(Defined Keratinocyte-SFM)中的一種；

其中，所述的無血清添加劑為選自B27添加劑(B27 supplement)、不包含維生素A的B27添加劑(B27 supplement without Vitamin A)以及N-2添加劑(N-2 supplement)中的一種；

其中，以所述的細胞培養組合物的總體積計，當所述的角質細胞無血清培養基以1倍稀釋比例使用時，所述的神經細胞培養用無血清添加劑以0.2-1倍的稀釋比例使用。

2.根據權利要求1所述的用途，其中，所述的上皮來源的腫瘤細胞選自肺癌細胞、乳腺癌細胞、前列腺癌細胞及食管癌細胞中的一種。

3.根據權利要求1或2所述的用途，其中，所述的細胞培養組合物中還包含：表皮細胞生長因子、成纖維細胞生長因子以及轉化生長因子β中的一種或多種。

4.根據權利要求1所述的用途，其中，所述的無血清添加劑為B27添加劑。

5.根據權利要求3所述的用途，其中，所述的表皮細胞生長因子的含量為5-50ng/ml；所述的成纖維細胞生長因子的含量為2.5-50ng/ml；所述的轉化生長因子β的含量為2-10ng/ml。

6.一種上皮來源的腫瘤細胞的原代培養方法，其包括：使用細胞培養組合物對所述的上皮來源的腫瘤細胞進行原代培養，其中所述的細胞培養組合物包含角質細胞無血清培養基和神經細胞培養用無血清添加劑，并且所述的細胞培養組合物中不包含血清；

其中，所述的角質細胞無血清培養基為選自角質細胞培養基II(Keratinocyte Medium II)、角質細胞無血清培養基(keratinocyte-SFM)以及成分確定的角質細胞無血清培養基(Defined Keratinocyte-SFM)中的一種；

其中，所述的無血清添加劑為選自B27添加劑(B27 supplement)、不包含維生素A的B27添加劑(B27 supplement without Vitamin A)以及N-2添加劑(N-2 supplement)中的一種；

其中，以所述的細胞培養組合物的總體積計，當所述的角質細胞無血清培養基以1倍稀釋比例使用時，所述的神經細胞培養用無血清添加劑以0.2-1倍的稀釋比例使用。

7.根據權利要求6所述的原代培養方法，其中，所述的細胞培養組合物中還包含：表皮細胞生長因子、成纖維細胞生長因子以及轉化生長因子β中的一種或多種。

8.根據權利要求7所述的原代培養方法，其中，所述的表皮細胞生長因子的含量為5-50ng/ml；所述的成纖維細胞生長因子的含量為2.5-50ng/ml；所述的轉化生長因子β的含量為2-10ng/ml。

9.根據權利要求6所述的原代培養方法，其中，所述的無血清添加劑為B27添加劑。

10.根據權利要求6所述的原代培養方法，其中，所述的原代培養方法包括以下步驟：

1)在體外用膠原酶對腫瘤組織進行消化，從而得到單個腫瘤細胞；以及

2)用所述的細胞培養組合物對步驟1)得到的腫瘤細胞進行培養，從而得到腫瘤細胞系。

11.根據權利要求6-10中任一項所述的原代培養方法，其中，所述的上皮來源的腫瘤細胞選自肺癌細胞、乳腺癌細胞、前列腺癌細胞或食管癌細胞。