[發明專利]毛細管酶陣列微反應器及應用

有效

• 申請號: 201310044436.6
• 申請日: 2013-02-05
• 公開（公告）號: CN103091385A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 申剛義;于婉婷;張愛芹;崔箭;曾鳴;烏日圖
• 申請（專利權）人: 中央民族大學
• 主分類號: G01N27/453
• 分類號: G01N27/453
• 代理公司: 北京五月天專利商標代理有限公司 11294
• 代理人: 涂蕭愷

1.一種毛細管酶陣列微反應器，其特征在于：包括至少一根毛細管以及在單一毛細管樣品進口端內壁依序分段排列具有能與底物相互作用的酶陣列，所述的毛細管為石英毛細管，內徑為25-220um；所述的酶陣列分段集成3-10種類型的酶。

2.根據權利1所述的毛細管酶陣列微反應器，其特征在于：所述的酶通過共價鍵結合固定于毛細管而形成；不同酶固定在毛細管中的不同位置。

3.權利要求1或2的毛細管酶陣列微反應器，其特征在于：所述的酶陣列的總長度占毛細管的總長度為8-12%。

4.權利要求1-3任意一項所述的毛細管酶陣列微反應器的制備方法，其特征在于毛細管的一端內壁進行氨基化衍生，然后通過調節不同酶的進樣壓力和時間，以控制酶的固定位置從而形成陣列。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：首先對毛細管內壁用0.1-1mol/L的鹽酸預處理10-30min，再用去離子水沖洗5-10min；接著利用毛細管電泳壓力從樣品進口端注入一段30-60mm的濃度為10%的3-氨丙基三甲氧基硅烷乙醇溶液，反應鍵合60-240min；反向通入空氣去除未鍵合于毛細管內壁的硅烷化試劑后將毛細管進口端與出口端分別置于去離子水中3-10min進行清洗；然后壓力進樣注入第一段濃度為4-8u/ml的固定酶溶液，長度為5-15mm，接著正向注入空氣將酶推入到距離進樣口較遠一端與3-氨丙基三甲氧基硅烷孵化反應10-20min；反向通入空氣推出后多余的酶溶液并清洗毛細管進口端；重復以上固定步驟，將其它酶依次注入到毛細管內形成單獨區段的酶陣列；酶陣列孵化60min以上后反向通入空氣去除未鍵合的酶；最后將毛細管進口端與出口端分別置于去離子水中3-10min進行清洗并采用pH為7.5-9.5、濃度為50-200mmol/L的緩沖液沖洗1-10min。

6.權利要求1-3任意一項所述的毛細管酶陣列微反應器在檢測酶與底物相互作用中的應用，其特征在于：基于毛細管電泳技術和液相色譜技術同時實現多種酶與底物的相互作用的檢測。

7.權利要求1-3任意一項所述的毛細管酶陣列微反應器在同時應用于多種酶抑制劑的高通量篩選中的應用，其特征在于：基于毛細管電泳技術和液相色譜技術相結合進行篩選。