[發明專利]具有免疫保護性的腦多頭帶絳蟲烯醇酶TmENO重組蛋白有效
| 申請號： | 201310043128.1 | 申請日： | 2013-02-04 |
| 公開（公告）號： | CN103131719A | 公開（公告）日： | 2013-06-05 |
| 發明（設計）人： | 李文卉;付寶權;曲自剛;謝志宙;劉靜宜 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12N15/60 | 分類號： | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/70;C12N15/11;A61K39/00;A61P33/10 |
| 代理公司： | 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102 | 代理人： | 張晉 |
| 地址： | 730046 甘肅*** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 具有 免疫 保護性 多頭 絳蟲 烯醇酶 tmeno 重組 蛋白 | ||
1.?一種具有免疫保護性的腦多頭帶絳蟲的重組蛋白，其特征是這種具有免疫保護性的重組蛋白是腦多頭帶絳蟲烯醇酶TmENO重組蛋白，其氨基酸序列是GenBank登錄號JQ627651的ORF序列編碼的氨基酸序列SEQ?No.?5。
2.根據權利要求1?所述的具有免疫保護性的腦多頭帶絳蟲重組蛋白，其特征在于對其編碼基因序列按大腸桿菌偏愛密碼子進行優化，優化后的基因序列為SEQ?No.?6。
3.權利要求1所述的重組蛋白的制備方法，其特征在于以腦多頭蚴原頭節基因組DNA為模板，分別以上下游引物SEQ?No.?1和SEQ?No.2進行PCR擴增得到該基因全序列。
4.權利要求2所述的重組蛋白的制備方法，其特征在于：在登陸號為JQ627651的ORF序列的5′端和3′端分別加上酶切位點NdeⅠ/?XhoⅠ后，然后將其按下表進行密碼子優化,
后人工合成基因SEQ?No.6，接著將合成的SEQ?No.6?的DNA產物與載體pET30a分別用NdeⅠ/XhoⅠ雙酶切進行連接，構建重組表達質粒pET30a-TmENO，再將pET30a-TmENO轉化到表達菌BL21(DE3)?中進行誘導表達，收集菌體并進行純化處理得到。
5.根據權利要求4所述的重組蛋白的制備方法，其特征在于以腦多頭蚴原頭節cDNA為模板，分別以上下游引物SEQ?No.?3和SEQ?No.4進行PCR擴增得到該基因編碼的蛋白。
6.根據權利要求4所述的重組蛋白的制備方法，其特征是人工合成該基因編碼的蛋白。
7.用于擴增權利要求2的重組蛋白的引物SEQ?No.?3和SEQ?No.4。
8.權利要求1或2所述的具有免疫保護性的腦多頭帶絳蟲重組蛋白在制備腦多頭蚴病疫苗中的應用。
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