[發(fā)明專利]一種免疫增強劑、滅活疫苗及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310042983.0
• 申請日: 2013-02-04
• 公開（公告）號: CN103083663A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發(fā)明（設計）人: 陳瑾;鄭其升;侯立婷;李鵬成;于曉明;徐海;侯繼波
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學院
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K9/107;A61K39/135;A61K39/12;A61K39/215;A61P31/20;A61P31/14
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 張立榮

技術領域

本發(fā)明涉及生物制藥領域，具體涉及一種免疫增強劑、滅活疫苗及其制備方法。

背景技術

口蹄疫（Foot?and?moush?disease,?FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-Mouth?Disease?Virus,?FMDV）引起的一種使偶蹄類動物發(fā)生的急性、熱性高度接觸性的傳染病。目前世界上很多國家都有這種疾病的流行，對畜牧業(yè)造成極大地經(jīng)濟損失。而且該病的隱性感染可以使患病動物的生產(chǎn)能力下降，造成巨大的經(jīng)濟損失，我國將其列為第一類動物疾病。

目前，國際上在口蹄疫的防控上主要采取兩種措施：緊急捕殺和免疫預防。在我國主要采取強制免疫預防，而對于急性爆發(fā)區(qū)采取封鎖捕殺政策。

疫苗的免疫注射是我國目前預防口蹄疫的主要措施，但現(xiàn)在使用的口蹄疫疫苗主要以滅活疫苗為主，現(xiàn)有的滅活疫苗的缺點也很明顯，在使用中存在疫苗免疫后抗體產(chǎn)生慢、抗體水平低、抗體持續(xù)期短及對變異毒株保護力差的缺點。蘭獸研資料表明，口蹄疫滅活疫苗免疫后40天抗體才能達到有效保護水平，抗體有效期只能維持90天。冉多良等調(diào)查發(fā)現(xiàn)當前豬口蹄疫疫苗免疫30天后，抗體合格率僅在26%-60%之間。曹波等研究表明豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫后3個月抗體效價水平明顯下降，免疫保護率僅為67.77%；與孟國慶等研究結(jié)果一致（66.7%）；另外，李云崗等檢測了3個廠家的O型疫苗抗體水平，結(jié)果免疫后3個月基本下降到免疫保護臨界值。所以在實際應用中，需要對免疫動物進行多次免疫，這些缺點不但造成了嚴重的經(jīng)濟損失，也不利于口蹄疫的疫情防控。

豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒引起豬的一種急性腸道傳染病。該病由豬流行性腹瀉病毒感染豬而引起，以發(fā)熱、厭食、水樣腹瀉、嘔吐、嚴重脫水、消化道黏膜發(fā)炎及糜爛和食欲下降為主要特征，俗稱冬季拉稀病。該病己成為世界流行性的疾病，是各養(yǎng)豬國家導致仔豬早期死亡的重要疫病之一。給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。豬流行性腹瀉的滅活疫苗為鋁膠佐劑，抗體產(chǎn)生期長，窗口期長，在冬季給免疫后未產(chǎn)生抗體的易感豬健康帶來極大的風險。

豬圓環(huán)病毒病是主要由豬2?型圓環(huán)病毒（PCV2）引起的免疫抑制性疾病，表現(xiàn)為斷奶后仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、豬呼吸道疾病綜合征（PRDC）、繁殖障礙、仔豬心肌炎、增生性和壞死性肺炎、飼料報酬低、死亡率上升等?，F(xiàn)有豬圓環(huán)病毒滅活苗，副反應較大，且需要免疫后3周加強免疫，給豬體帶來嚴重的外界刺激。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種免疫增強劑，能夠顯著提高免疫動物對抗原的免疫應答，提高抗體水平，從而提高疫苗的免疫效果，同時能夠縮短免疫窗口期，延長保護期。

本發(fā)明的另一目的是提供含有所述免疫增強劑的滅活疫苗，其免疫后抗體水平高，免疫效果好，免疫窗口期短，保護期延長。

本發(fā)明的目的是提供上述滅活疫苗的制備方法，該方法簡單方便，成本低。

一種免疫增強劑，所述免疫增強劑含有0.1-21mg/mL的單磷酰脂質(zhì)A、1.5-125mg/mL的胞壁酰二肽和0.7-4.5mg?/mL的β-葡聚糖。

所述免疫增強劑為油乳劑。

所述油乳劑的制備方法如下：

（1）配制水相溶液：將含有單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰二肽和β-葡聚糖的母液與吐溫-80混合，得到成水相溶液；

（2）?配制油相溶液：將白油和司盤-80混合，得到油相溶液；

（3）?將所述水相溶液與油相溶液混合乳化后，得所述獸用免疫增強劑。

一種含有所述免疫增強劑的滅活疫苗。

所述滅活疫苗還包括滅活的抗原溶液。

所述滅活疫苗還包括油相溶液。

所述免疫增強劑與滅活的抗原溶液組成了水相溶液，所述水相溶液與油相溶液的體積比為46:40-60；所述水相溶液中免疫增強劑與滅活的抗原溶液的體積比為1:1-3。

所述油相溶液為ISA206。

所述滅活的抗原溶液為滅活的豬O型口蹄疫病毒液、豬圓環(huán)病毒2型病毒液和豬流行性腹瀉病毒液。

一種所述滅活疫苗的制備方法，將免疫增強劑與滅活的抗原溶液混合，得到水相溶液；將水相溶液與油相溶液混合，得到滅活疫苗。

本發(fā)明免疫增強劑由于其組分之間的協(xié)同效應，提高機體的免疫水平、對抗原的免疫應答，從而提高免疫后的抗體水平、縮短免疫窗口期，增強疫苗的免疫效果。

本發(fā)明含有免疫增強劑的滅活疫苗，免疫后產(chǎn)生的抗體水平高，保護期長，免疫窗口期短。

本發(fā)明含有免疫增強劑的滅活疫苗的制備方法簡單，易操作，成本低。