[發明專利]鑒別或輔助鑒別花臉蘑原生質體單核體交配型的方法及其專用引物對IS-818

有效

• 申請號: 201310042607.1
• 申請日: 2013-02-04
• 公開（公告）號: CN103184280A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 許峰;劉宇;李登進;王守現;趙爽;耿小麗;王蘭青
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.鑒別或輔助鑒別花臉蘑原生質體單核體交配型的方法，包括如下步驟：分別以待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的基因組DNA為模板，用由SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的兩條單鏈DNA組成的PCR引物對進行PCR擴增，檢測所得到的PCR產物的大小，根據PCR擴增產物的大小按照下述方法確定所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的交配型：

如果所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的PCR產物均含有800bp-1000bp的DNA片段，所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的交配型相同或候選為交配型相同，如果所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的PCR產物均不含有800bp-1000bp的DNA片段，所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的交配型相同或候選為交配型相同；如果所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體中的一株待鑒別的花臉蘑原生質體單核體的PCR產物含有800bp-1000bp的DNA片段，另一株待鑒別的花臉蘑原生質體單核體的PCR產物不含有800bp-1000bp的DNA片段，所述待鑒別的兩株花臉蘑原生質體單核體的交配型不同或候選為交配型不同。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述800bp-1000bp的DNA片段為861bp的DNA片段。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增采用的引物退火條件為62℃退火30s。

4.根據權利要求1或2或3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增中采用的PCR反應溫度程序：94℃預變性5min；94℃變性30s，62℃退火30s，72℃延伸40s，30個循環；72℃延伸7min。

5.權利要求1-4中任一所述的方法在花臉蘑育種中的應用。

6.鑒別或輔助鑒別花臉蘑原生質體單核體交配型的PCR引物對，其特征在于：所述引物對的名稱為IS-818，由SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的兩條單鏈DNA組成。

7.含有權利要求6所述的PCR引物對的鑒別或輔助鑒別花臉蘑原生質體單核體交配型的試劑。

8.含有權利要求6所述的PCR引物對的鑒別或輔助鑒別花臉蘑原生質體單核體交配型的試劑盒。

9.權利要求6所述的PCR引物對、權利要求7所述的試劑或權利要求8所述的試劑盒在鑒別或輔助鑒別花臉蘑原生質體單核體交配型中的應用。

10.權利要求6所述的PCR引物對、權利要求7所述的試劑或權利要求8所述的試劑盒在花臉蘑育種中的應用。