[發明專利]一種脫細胞瞼板及其制備方法

無效

• 申請號: 201310042418.4
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103127549A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 梁軒偉;王忠浩;王智崇;黃丹平;周強
• 申請（專利權）人: 中山大學中山眼科中心
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

1.一種脫細胞瞼板的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：以異種動物或同種異體的瞼板為原料，經過去細胞處理，得到脫細胞瞼板。

2.根據權利要求1所述的脫細胞瞼板的制備方法，其特征在于，所述的瞼板為異種動物或同種異體的部分眼瞼組織或全部眼瞼組織或連有皮膚、肌肉或/和結膜的眼瞼組織。

3.根據權利要求1或2所述的脫細胞瞼板的制備方法，其特征在于，所述的去細胞處理為使用陰離子表面活性劑SDS或去垢劑Triton?x-100去除細胞膜成分，進行去細胞處理。

4.根據權利要求3所述的脫細胞瞼板的制備方法，其特征在于，所述的使用陰離子表面活性劑SDS去除細胞膜成分進行去細胞處理，其步驟為：將瞼板浸泡于質量百分數0.05~5%的陰離子表面活性劑SDS溶液中，在溫度為4~45℃，處理4~24小時，由此得到脫細胞瞼板。

5.根據權利要求3所述的脫細胞瞼板的制備方法，其特征在于，所述的使用去垢劑Triton?X-100去除細胞膜成分進行去細胞處理，其步驟為：將瞼板浸泡于質量百分數0.01~5％的去垢劑Triton?X-100溶液中，在溫度為4~45℃，處理24~48小時，由此得到脫細胞瞼板。

6.根據權利要求3所述的脫細胞瞼板的制備方法，其特征在于，所述的去細胞處理為：在10℃震蕩條件下，將瞼板置入碳酸鹽緩沖液中，清洗瞼板后轉移至水中浸泡1h，然后在37℃震蕩條件下，將瞼板浸入脫細胞溶液Ⅰ中處理6h，10℃震蕩條件下，再用碳酸鹽緩沖液中清洗瞼板，37℃震蕩條件下，將清洗后的瞼板浸入脫細胞溶液II中處理2h，10℃震蕩條件下，再用碳酸鹽緩沖液清洗處理后的瞼板，再將清洗后的瞼板固定于人工前房上，置于恒溫干燥器中，在25℃，相對濕度為20%的條件下，干燥至瞼板的初重，由此得到脫細胞瞼板；

所述的碳酸鹽緩沖液為含105mM?NaCl，5.5mM?KCl，1.8mM?CaCl₂，0.8mM?MgCl₂，5mM葡萄糖，35mM?NaHCO₃，余量為水，pH8.3，滲透壓為322mosmol/kg，再經0.22μm微孔濾膜過濾后，加入青霉素、鏈霉素和兩性霉素，使其終濃度為100IU/ml，100μg/ml和0.625μg/ml；

所述的脫細胞溶液Ⅰ為含磷脂酶A₂200U/ml，0.5%（w/v）脫氧膽酸鈉的碳酸鹽緩沖液，再經0.22μm微孔濾膜過濾后，加入青霉素、鏈霉素和兩性霉素，使其終濃度為100IU/ml，100μg/ml和0.625μg/ml；

所述的脫細胞溶液II為含PLA2200U/ml的碳酸鹽緩沖液，再經0.22μm微孔濾膜過濾后，加入青霉素、鏈霉素和兩性霉素，使其終濃度為100IU/ml，100μg/ml和0.625μg/ml。

7.一種脫細胞瞼板，包括兩側的瞼板，在瞼板之間具有數個相互走向的膠原纖維板層，在膠原纖維板層之間具有若干個瞼板腺管，膠原纖維板層之間還具有細胞被脫去后形成的空隙。

8.根據權利要求7所述的脫細胞瞼板，其特征在于，所述的瞼板腺管為1~50個。

9.根據權利要求8所述的脫細胞瞼板，其特征在于，所述的瞼板腺管為20~50個。

10.根據權利要求7所述的脫細胞瞼板，其特征在于，所述的脫細胞瞼板的厚度為0.01~10.0mm，直徑為0.5mm~40mm的圓形、方形或不規則形。