[發明專利]表沒食子兒茶素沒食子酸酯印跡聚合物整體柱的制備方法

無效

• 申請號: 201310041485.4
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103071471A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 劉照勝;孫璇;黃艷萍;阿吉艾克拜爾·艾薩
• 申請（專利權）人: 中國科學院新疆理化技術研究所
• 主分類號: B01J20/285
• 分類號: B01J20/285;B01J20/26;B01J20/30;C08F222/14;C08F220/56;C08F2/44;C08J9/26
• 代理公司: 烏魯木齊中科新興專利事務所 65106
• 代理人: 張莉

技術領域

本發明涉及一種原位聚合法制備表沒食子兒茶素沒食子酸酯分子印跡聚合物整體柱的方法。

背景技術

分子印跡技術是指以特定的分子為模板，制備對該分子有特殊識別功能和高選擇性材料的技術，通常被人們描述為制造識別“分子鑰匙”的“人工鎖”技術。它將模板分子、單體、交聯劑溶解在一定的溶液中形成預聚合溶液，經過聚合反應形成具有與模板分子在空間結構上完全匹配、并與模板分子特異性結合的功能基的三維空穴的聚合物。當前MIP的制備方法很多，主要有：（1）本體聚合法；（2）懸浮聚合法；（3）分散聚合法；（4）沉淀聚合法；（5）表面印跡聚合法等等。但這些方法存在一些缺陷，如本體聚合制備的MIP，必須經過研磨、篩分等處理。但在研磨過程中不可避免地破壞部分結合位點，得到粒子形狀不均勻，最終MIP的產率只有50%左右；懸浮聚合法制備平均粒徑小于10μm的MIP時，產物的單分散性和規整性都急劇下降，且亞微米級的微球難以得到；分散聚合法制備過程較為復雜，且所用到的分散劑和惰性分散體系昂貴；沉淀聚合法產率低；表面模板聚合法制備方法雖然較為簡單，但只能進行少部分特定分子的印跡，應用范圍較窄。此外，上述方法在實際應用前都需要經過繁瑣的裝柱技術。原位聚合是近期發展的制備MIP的新技術，可通過一步聚合完成反應，在空的色譜柱內用該法形成的整體柱通過洗脫除去模板分子后可直接應用。該技術的關鍵是針對不同的模板分子尋找具有合適的致孔劑體系和聚合體系，以獲得具有良好的通透性、選擇性及高柱效的MIP整體柱。

表沒食子兒茶素沒食子酸酯為茶多酚中最有效的活性成分，具有顯著的抗突變、抗氧化作用，能夠增強免疫系統功能，抑制肝脂和膽固醇的增長，抑制腫瘤的生長，對痢疾、傷寒、金黃色葡萄球菌等細菌也有極強的抑制作用。現已被列為潛在的抗癌藥物在中美等國被研究。由于表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）與兒茶素中其它組分的化學結構和性質十分相近，而且極易氧化，聚(縮)合，因而很難得到高純度的表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）單體。因此對分離提純表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）單體的研究具有很重要的現實意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種原位聚合制備表沒食子兒茶素沒食子酸酯印跡聚合物整體柱的方法，該方法將預聚合混合溶液直接注入到不銹鋼管柱內制備連續棒形聚合物，得到具有固定空穴大小和形狀、有確定排列功能團、識別模板分子的交聯高聚物材料，即分子印跡聚合物（MIP）。經該方法得到的分子印跡聚合物（MIP）整體柱不僅具有印跡效果，而且具有滲透性好的優點，印跡因子可達3.09，同時該方法制備過程簡單，內部結構均勻，重現性好，避免了繁瑣的裝柱手續，可直接用于分析。

本發明所述的一種表沒食子兒茶素沒食子酸酯印跡聚合物整體柱的制備方法，采用原位聚合法制備，具體操作按下列步驟進行：

a、將質量百分數模板分子為表沒食子兒茶素沒食子酸酯2.88-5.6%、功能單體為丙烯酰胺5.1-5.45%、交聯劑為二甲基丙烯酸乙二醇酯72.62-74.71%、致孔劑為聚苯乙烯溶于四氫呋喃的溶液5.28-5.50%混合，再加入異辛烷10.5-10.53%，引發劑為偶氮二異丁腈0.90-0.93%進行混合，超聲20分鐘，使其均勻，澄清，然后轉移到干凈的不銹鋼管柱中，超聲脫氣15分鐘，將不銹鋼管柱兩端封住，于溫度60℃的恒溫水浴鍋內反應20-28小時；

b、將不銹鋼管柱取出并連接到HPLC的高壓泵上，先用四氫呋喃沖洗，以除去整體柱中殘留的致孔劑，然后用甲醇和乙酸的混合液沖洗至除去模板分子，流速由0.1ml/mim逐漸增大，沖洗液總體積為150ml，即可得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯分子印跡整體柱。

步驟a中的致孔劑聚苯乙烯溶于四氫呋喃溶液中的濃度為40mg/ml。

步驟a中的不銹鋼管柱為100×4.6mm?I.D.。

步驟b中甲醇和乙酸的混合液為體積比甲醇:乙酸=9:1。

本發明所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯印跡聚合物整體柱的制備方法，該方法首次采用原位聚合合成表沒食子兒茶素沒食子酸酯分子印跡聚合物整體柱，該方法通過將預聚合溶液注入到空的色譜柱中，在柱管內一步完成聚合；該方法制備過程簡單，簡化實驗過程，容易操作，由于聚合過程一步完成，避免了復雜的裝柱程序，大大減少操作時間。