[發(fā)明專利]一種過敏原基本消除的深度水解酪蛋白肽工業(yè)化制造方法及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310037367.6
• 申請日: 2013-01-31
• 公開（公告）號: CN103966293A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蔡木易;谷瑞增;林峰;易維學(xué);魯軍;馬勇;董哲;潘興昌;馬永慶;徐亞光;金振濤;陳亮;劉文穎;劉艷;馬濤
• 申請（專利權(quán)）人: 中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A23L1/305;A23C9/152;A61K38/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及以酪蛋白為原料，制備過敏原基本消除的低致敏性深度水解酪蛋白肽的工業(yè)化生產(chǎn)方法，產(chǎn)品可應(yīng)用于普通食品、運動功能食品、嬰幼兒配方奶粉及食品、成年奶粉及食品、中老年奶粉及食品、保健食品和藥品，屬生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

近年來，食物過敏的發(fā)病率呈上升趨勢，嬰幼兒的食物過敏發(fā)病率約為6％-8％遠(yuǎn)高于成人。其中，牛奶過敏(CMPA)最為常見。牛奶蛋白過敏癥是指人體對一種或幾種牛奶蛋白質(zhì)(CMP)發(fā)生的免疫學(xué)反應(yīng)。已知5％～15％的嬰幼兒在攝入CMP時會出現(xiàn)異常反應(yīng)并有臨床表現(xiàn)。CMPA的臨床表現(xiàn)可累及皮膚、呼吸系統(tǒng)、消化道等多種器官。患兒皮膚表現(xiàn)主要為特應(yīng)性皮炎如濕疹、瘙癢、皮疹、蕁麻疹、水腫、干燥等，呼吸道癥狀一般是哮喘、咳嗽、過敏性鼻炎，嚴(yán)重時有些患兒甚至還會出現(xiàn)急性過敏綜合征，存在著生命危險。因此，開發(fā)低敏牛乳蛋白配方對于改善和促進(jìn)嬰幼兒的營養(yǎng)和生長發(fā)育具有重要的意義。

通過對牛奶蛋白進(jìn)行加熱和酶解，使之成為小肽段，可以有效的改變牛奶蛋白的抗原決定簇，降低蛋白的抗原性。有研究顯示，采用雙酶分步水解法將酪蛋白進(jìn)行水解，將水解物按照分子量大小進(jìn)行分離，測定不同分子量片段的抗性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)分子量越小，抗原性越低(Wróblewska，B等.Acta Alimentaria.2005，34(3)：307-315)。深度水解酪蛋白肽就是通過超濾酶解等特殊工藝使其成為二肽、三肽、四肽等小分子物質(zhì)，消除過敏原表位的空間構(gòu)象和序列，從而基本上完全去除了酪蛋白的致敏活性。美國兒科學(xué)會(AAP)指出深度水解牛奶蛋白可有效的預(yù)防和減輕牛奶過敏癥狀。歐洲兒童臨床免疫和過敏協(xié)會也建議使用深度水解乳蛋白治療牛奶過敏。

國外目前已有一些低致敏性的牛乳水解產(chǎn)品上市，如雀巢公司的小百肽、超級能恩，雅培公司的Similac等均為水解的嬰幼兒配方奶粉。但是目前在國內(nèi)，牛乳過敏問題還未引起足夠的重視，有關(guān)牛乳過敏的產(chǎn)品較少。雖然有關(guān)于牛乳過敏的報道，但普遍存在著產(chǎn)品定位不清、肽段組分過大、致敏活性難以消除、生產(chǎn)規(guī)模不大、特征肽段不清等方面的不足。CN1105818A公開了一種乳蛋白水解的方法，抗原性得以降低，但主要采用胰蛋白酶，種類單一，且工藝為部分水解工藝，依然存在大分子的過敏原蛋白組分。CN1784145A公開了一種包含三肽IPP或者VPP的酪蛋白產(chǎn)物，產(chǎn)品定位于降血壓活性，并沒有對其致敏活性進(jìn)行研究。CN102379359A公開了一種酶法水解酪蛋白的方法，產(chǎn)品過敏原含量顯著下降，但是發(fā)明局限于蛋白酶解工藝，缺乏后序的純化步驟，分子量大于5000Da的大分子蛋白依然大量存在。CN1494384A提供了一種牛乳蛋白制備蛋白水解物的方法，苦味較小，但是發(fā)明不涉及致敏活性的控制工藝。

此外，酪蛋白通過體外水解方式可以得到特定的蛋白片段(肽)，具有獨特的生理或生化活性，這些 肽段不僅消除了大部分的致敏活性，促進(jìn)人體吸收消化，還具有廣泛的生理調(diào)節(jié)功能，如激素作用、參與肌體免疫調(diào)節(jié)、降血壓、降膽固醇、抗氧化、抗血栓、促進(jìn)礦物質(zhì)吸收等，可廣泛的應(yīng)用于普通食品、運動功能食品、嬰幼兒配方奶粉及食品、成年奶粉及食品、中老年奶粉及食品、保健食品和藥品的開發(fā)與生產(chǎn)，具有廣闊的市場前景。

綜上，經(jīng)檢索沒有發(fā)現(xiàn)采用酶解復(fù)合超濾工藝生產(chǎn)過敏原基本消除的深度水解酪蛋白肽的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的提供一種制備過敏原基本消除的深度水解酪蛋白肽的工業(yè)化生產(chǎn)方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種低致敏性的酪蛋白深度水解物。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

發(fā)明采用復(fù)合酶解結(jié)合超濾的方法，將食品級酪蛋白以100∶6～12(L∶kg)的液料比與水混配調(diào)漿，調(diào)整pH值范圍為7～9，加熱至60～90℃，保溫攪拌20～60min。降溫至40～60℃，按每克蛋白質(zhì)2000～5000單位酶量加入Alcalase，反應(yīng)3～5小時。然后，按每克蛋白質(zhì)1000～2000單位酶量加入木瓜蛋白酶，溫度45～55℃，酶解1～2小時。最后，將酶解液加熱到120℃，滅酶10min。