[發明專利]一種辣根過氧化物酶黑色顯色劑及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201310036049.8
• 申請日: 2013-01-20
• 公開（公告）號: CN103323448B
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 李湘麒;譚毅;張弛;梁廣
• 申請（專利權）人: 溫州醫科大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司44245
• 代理人: 裘暉

1.一種辣根過氧化物酶黑色顯色劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)以水為溶劑分別配制：無水乙醇溶解的25mg/mL 4-氯-1-萘酚(4-CN)，50mg/mL 3,3’-二氨基聯苯胺(DAB)，0.1M醋酸銨溶解的50mg/mL硫酸鎳銨，0.5g/mL氯化鈷，0.5g/mL咪唑，1M硼酸，20mg/mL MgCl₂，20mg/mL MnCl₂，25mg/mL亞硝基鐵氰化鈉，12mg/mL甜菜堿，2mg/mL明膠，0.2g/mL硫酸葡聚糖，1％(V/V)四氫呋喃，1％(V/V)丙酮；

(2)取25mg/mL 4-CN 2.5μL，50mg/mL DAB 2.5μL，50mg/mL硫酸鎳銨5μL，0.5g/mL氯化鈷0.5μL，0.5g/mL咪唑0.5μL，1M硼酸1μL，20mg/mL MgCl₂ 1μL，20mg/mL MnCl₂ 1μL，25mg/mL亞硝基鐵氰化鈉1μL，12mg/mL甜菜堿1μL，2mg/mL明膠1μL，0.2g/mL硫酸葡聚糖1μL，1％(V/V)四氫呋喃1μL，1％(V/V)丙酮1μL，聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)1μL，30wt％H₂O₂ 1μL，1×TBS緩沖液979μL混勻得到辣根過氧化物酶黑色顯色劑。

2.一種辣根過氧化物酶黑色顯色劑，其特征在于：通過權利要求1所述的制備方法制備得到。

3.根據權利要求2所述的辣根過氧化物酶黑色顯色劑，其特征在于：所述的辣根過氧化物酶黑色顯色劑的最終顯色產物為黑色沉淀。

4.權利要求2或3所述的辣根過氧化物酶黑色顯色劑在核酸/蛋白檢測中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：所述的辣根過氧化物酶黑色顯色劑用于辣根過氧化物酶顯色。