[發明專利]混合制劑中鹽酸嗎啉胍含量和乙酸銅含量的檢測方法

有效

• 申請號: 201310035297.0
• 申請日: 2013-01-30
• 公開（公告）號: CN103091443A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 曾顯斌;曾蕓;夏中梅;黃秀輝;侯勇;朱培玲;陳浩;胡甦;王蘭英;敬華英
• 申請（專利權）人: 四川省農業科學院生物技術核技術研究所;四川省蘭月科技有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 成都立信專利事務所有限公司 51100
• 代理人: 江曉萍

技術領域：

本發明涉及一種測定鹽酸嗎啉胍·乙酸銅混合制劑中鹽酸嗎啉胍含量和乙酸銅含量的檢測方法。

背景技術：

鹽酸嗎啉胍別名為病毒靈，嗎啉胍，嗎啉咪胍，鹽酸嗎啉雙胍。乙酸銅又稱醋酸銅，別名一水醋酸銅。是一種廣譜、低毒病毒防治劑,是一種有機銅殺菌劑。

鹽酸嗎啉胍的結構式：????????????????????????????????????????????????

???????乙酸銅的結構式：

在農業上，鹽酸嗎啉胍作為防治植物病害的殺菌劑，主要用來防治番茄病毒病，對番茄、青椒、黃瓜、甘藍、大白菜、煙草等多種作物發生的花葉病、蕨葉病、條斑病具有預防和治療作用。乙酸銅殺菌機理主要是銅離子與病源細胞膜表面上的陽離子（H⁺、K⁺等）交換，導致病源細胞膜上的蛋白質凝固，從而殺死病菌；部分銅離子可滲透進入病源細胞膜內，與多種酶結合，影響代謝酶的活性，導致病源菌代謝機理失調，病菌因而衰竭死亡。作為銅離子殺菌劑對病源細菌、真菌、病毒都有良好的滅殺效果。廣泛應用于葡萄、柑橘病菌的防治，也適用于黃瓜、西瓜、番茄、辣椒、茄子等蔬菜以及棉花、水稻等多種作物。以往對鹽酸嗎啉胍的檢測方法有液相色譜法、氣相色譜法、極譜法、紫外分光光度法等；對乙酸銅的檢測方法常采用碘量法和絡合滴定法；混合制劑中，對二者的檢測，通常采用二次取樣，用不同方法分別進行測定，這樣既費時間，又浪費藥品。

發明內容：

本發明的目的是為了克服現有技術中對混合制劑中鹽酸嗎啉胍和乙酸銅含量的檢測必須采用二次取樣，用不同方法分別進行定量檢測的不足，提供一種在同柱同條件下同時測定鹽酸嗎啉胍和乙酸銅含量簡單快速、節約時間和檢測成本的混合制劑中鹽酸嗎啉胍含量和乙酸銅含量的檢測方法。

本發明的目的是這樣來實現的：

本發明混合制劑中鹽酸嗎啉胍含量和乙酸銅含量的檢測方法包括以下步驟：

1）采用反相高效液相色譜法，其色譜條件如下：

色譜柱：C₁₈，5μm，150×4.6mm(I.D)；

流動相組成：按體積比（V／V）甲醇:緩沖溶液=70～50:30～50，并以冰乙酸調節pH=3～5；

緩沖溶液組成：按體積比（V/V）乙酸鈉-乙酸:陰離子對試劑=1～3:～31；

流速：1.0ml/min；

柱溫：30℃；

檢測波長：237nm；

進樣體積：20.0μl；

2）分別配制鹽酸嗎啉胍和乙酸銅標準溶液及樣品溶液；

3）用二極管陣列檢測器在200～400nm之間進行連續掃描；

4）制作標準曲線，測定峰面積，計算出樣品主成分的含量。

上述的方法中按體積比甲醇:緩沖溶液=55:45，按體積比乙酸鈉-乙酸:陰離子對試劑=3:1，pH=3.5。

上述的陰離子對試劑為甲烷基磺酸鹽（如甲烷基磺酸鈉、甲烷基磺酸鉀等）、戊烷基磺酸鹽（如戊烷基磺酸鈉、戊烷基磺酸鉀等）、己烷基磺酸鹽（如己烷基磺酸鈉、己烷基磺酸鉀等）、庚烷基磺酸鹽（如庚烷基磺酸鈉、庚烷基磺酸鉀等）、十二烷基磺酸鹽（如十二烷基磺酸鈉、十二烷基磺酸鉀等）、樟腦磺酸鹽（如樟腦磺酸鈉、樟腦磺酸鉀等）、辛烷基硫酸鹽（如辛烷基硫酸鈉、辛烷基硫酸鉀等）、癸烷基硫酸鹽（如癸烷基硫酸鈉、癸烷基硫酸鉀等）、十二烷基硫酸鹽（如十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鉀等）中的一種。

上述的方法中將測定主要成分含量的進樣樣品用水溶解，樣品濃度配制成10μg/ml～200μg/ml后，再測定鹽酸嗎啉胍和乙酸銅的含量。

上述的乙酸鈉-乙酸的濃度為0.01mol/L～0.02mol/L，陰離子對試劑的濃度為0.01mol/L～0.02mol/L。

本發明所需的試劑與藥品如下：

鹽酸嗎啉胍對照品（＞99.0%wt%）；

乙酸銅對照品（＞99.0%wt%）

甲醇：HPLC級

乙酸：分析純

乙酸鈉：分析純

實驗中流動相和溶液用水均為純水。

本發明方法采用C₁₈反相色譜柱，在乙酸鈉-乙酸溶液中，保證了緩沖體系中pH值的穩定性，在緩沖體系中加入陰離子對試劑，更有效地提高了鹽酸嗎啉胍和乙酸銅的分離效果，最后用冰乙酸來調節pH值，有效地減小了峰的拖尾，使峰型更加對稱。