[發明專利]一株降解金霉素的草酸青霉LJ302

有效

• 申請號: 201310035163.9
• 申請日: 2013-01-30
• 公開（公告）號: CN103266064A
• 公開（公告）日: 2013-08-28
• 發明（設計）人: 李艷菊;楊正禮;肖思穎
• 申請（專利權）人: 北京理工大學;楊正禮
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A62D3/02;C02F3/34;C12R1/80;A62D101/28;C02F101/38
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技術領域

本發明涉及一株能夠降解金霉素的草酸青霉（Penicillium?oxalicum）LJ302，屬于微生物技術領域。?

背景技術

金霉素屬四環素類藥物，主產我國，屬于一種廣譜性抗生素，主要抑制敏感微生物的蛋白質合成，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、螺旋體、立克次氏體、支原體、衣原體、部分原蟲等有抑制作用，在醫藥、畜牧業等領域具有較廣的用途。?

在金霉素發酵生產過程中，會產生大量含有金霉素殘留的菌渣和廢水，若處理不當進入環境,將會對生態環境和和人類健康造成潛在危害。目前，金霉素廢棄物的生物脫毒處理已成為生產企業亟待解決的重大問題。與此同時，金霉素菌渣中蛋白質含量較高，同時含有礦物質等多種營養成分，資源化利用潛力巨大。篩選并利用高效降解金霉素的微生物菌株，應用于企業廢棄物與環境中金霉素污染修復處理，不僅可以減少金霉素對環境的危害，同時，可為菌渣的資源化利用和變廢為寶提供基礎條件。?

目前，國內外對金霉素降解菌株的篩選以及利用高效菌株降解金霉素廢棄物的研究報導極少。而有關草酸青霉降解金霉素方面的研究，國內外尚未見到報導。?

發明內容

本發明的目的在于提供一株金霉素降解菌株草酸青霉LJ302以及基因。?

本發明所提供的金霉素降解菌株LJ302，為草酸青霉（Penicillium?oxalicum）。該菌株已于2012年12月19日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC），保藏號為：CGMCC?No.7019。?

本發明的一株金霉素降解菌株LJ302的基因，是草酸青霉（Penicilliumoxalicum）LJ302的rDNA-ITS基因，通過基因組DNA的提取，rDNA-ITS序列的擴增，rDNA-ITS全序列測定和分析而獲得。該菌株rDNA-ITS全序列如下：?

GAACCTGCGG?AAGGATCATT?ACCGAGTGAG?GGCCCTCTGG?GTCCAACCTC?CCACCCGTGT???60?

TTATCGTACC?TTGTTGCTTC?GGCGGGCCCG?CCTCACGGCC?GCCGGGGGGC?ATCCGCCCCC??120?

GGGCCCGCGC?CCGCCGAAGA?CACACAAACG?AACTCTTGTC?TGAAGATTGC?AGTCTGAGTA??180?

CTTGACTAAA?TCAGTTAAAA?CTTTCAACAA?CGGATCTCTT?GGTTCCGGCA?TCGATGAAGA??240?

ACGCAGCGAA?ATGCGATAAG?TAATGTGAAT?TGCAGAATTC?AGTGAATCAT?CGAGTCTTTG??300?

AACGCACATT?GCGCCCCCTG?GTATTCCGGG?GGGCATGCCT?GTCCGAGCGT?CATTGCTGCC??360?

CTCAAGCACG?GCTTGTGTGT?TGGGCTCTCG?CCCCCCGCTT?CCGGGGGGCG?GGCCCGAAAG??420?

GCAGCGGCGG?CACCGCGTCC?GGTCCTCGAG?CGTATGGGGC?TTCGTCACCC?GCTCTGTAGG??480?

CCCGGCCGGC?GCCCGCCGGC?GAACACCATC?AATCTTAACC?AGGTTGACCT?CGGATCAGGT??540?

AGGGATACCC?GCTGAACTTA?AGCATATCAA?TA????????????????????????????????572?

上述rDNA-ITS序列由572個堿基（bp）組成。?

本發明中的菌株LJ302的菌落形態特征為：在馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養基上培養3天，菌落直徑為10-18mm，菌落中心草綠色至深綠色，表面常分泌出水珠，邊緣菌絲白色呈絨毛狀，菌落背面為淺肉色。該菌株在顯微鏡下觀察，菌絲細胞絲狀交織，有橫隔，從菌絲體上生出分生孢子梗，具青霉屬典型的帚狀枝，最末級的小枝上生出成串的分生孢子，分生孢子橢圓形，光滑。?

本發明中的金霉素降解菌株LJ302能夠在以金霉素為唯一碳源的培養基中生長，在金霉素濃度為100mg/L-5000mg/L的濃度條件下生長較好；菌株LJ302?在以金霉素為唯一碳源且金霉素濃度為500mg/L的液體培養基中進行培養，該菌株對金霉素的降解率可達84.26%。?