[發(fā)明專利]塵螨過敏原Der f 28及其基因和應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310034025.9
• 申請日: 2013-01-29
• 公開（公告）號: CN103059119A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賴仞;安輸;容明強(qiáng);李東升
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院昆明動物研究所
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;A61K39/35;A61P37/08
• 代理公司: 昆明今威專利商標(biāo)代理有限公司 53115
• 代理人: 楊宏珍

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種塵螨過敏原Der?f?28及其基因和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

過敏性疾?。ㄈ缦⑦^敏性鼻炎等）是臨床上的常見病、多發(fā)病，世界各國過敏性疾病的總發(fā)病率高達(dá)10-30%，是當(dāng)前世界性的重大衛(wèi)生學(xué)問題，目前我國現(xiàn)有哮喘患者2000多萬，過敏性鼻炎患者5000多萬，并且其發(fā)病率和死亡率仍呈上升趨勢，近二十年來發(fā)病率幾乎翻了一倍。在引起過敏性疾病的眾多吸入性過敏原中，塵螨是導(dǎo)致呼吸道變態(tài)反應(yīng)性疾病的最重要因素。自從Voorhorst和Spieksma（1964）首次證實(shí)塵螨及代謝產(chǎn)物是屋塵中的主要過敏原以來，世界各國（歐美國家、日本、中國等）變態(tài)反應(yīng)學(xué)工作者通過大量調(diào)查也一致證實(shí)塵螨是世界性的主要變應(yīng)原。塵螨在過敏性疾病患者特異性免疫診斷中陽性率約70-80%。自從Noon和Freeman（1911）首次應(yīng)用梯牧草花粉變應(yīng)原浸液（allergen?extract）用于治療花粉癥以來，脫敏治療至今已有90多年的歷史。隨著對變態(tài)反應(yīng)疾病發(fā)病機(jī)制的深入研究以及免疫治療機(jī)制的進(jìn)一步了解，WHO（1997）建議將變應(yīng)原浸液改稱為變應(yīng)原疫苗（allergen?vaccine），并且在《WHO有關(guān)免疫治療的指導(dǎo)文件》（1998）指出：（1）鼓勵應(yīng)用和發(fā)展標(biāo)準(zhǔn)化的變應(yīng)原疫苗；（2）成功的免疫治療取決于高質(zhì)量的變應(yīng)原疫苗。因此，研制出新一代高效變應(yīng)原疫苗仍是國內(nèi)外該領(lǐng)域研究熱點(diǎn)。

由于塵螨系醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物，結(jié)構(gòu)和成份復(fù)雜，盡管目前人們在塵螨數(shù)百種蛋白中已初步鑒定出16種過敏原成份，研究顯示塵螨含有的過敏原多達(dá)30余種。就某一個塵螨過敏病人而言，他可能僅對塵螨中的一類或數(shù)類過敏原蛋白產(chǎn)生過敏反應(yīng)。而目前在臨床上用于塵螨過敏患者診斷和脫敏治療的仍然為塵螨粗浸液，其中含有大量對患者非特異的過敏原及其它雜質(zhì)，這嚴(yán)重阻礙了塵螨過敏原試劑標(biāo)準(zhǔn)化的制定及其在臨床上的使用。所以進(jìn)一步探明塵螨過敏原的確切組分，將會為塵螨過敏患者帶來個體化的脫敏治療。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于一種塵螨過敏原Der?f?28及其基因和應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)方案包括塵螨過敏原Der?f?28的制備和氨基酸序列測定，塵螨過敏原Der?f?28基因序列的克隆，Der?f?28過敏原性的鑒定三部分內(nèi)容。

Der?f?28是我們首次從塵螨勻漿中分離純化得到的一種新的過敏原蛋白，它屬于熱休克-70蛋白家族（Heat?shock?protein?70），分子量約70?kDa。Der?f?28由659個氨基酸組成，其氨基酸序列如下（SEQ?ID?NO:1）：

MSKTPAIGIDLGTTYSCVGVFQHGKVEIIANDQGNRTTPSYVGFTDTERLIGDAAKNQVA?60

MNPSNTVFDAKRLIGRKFDETTVQADMKHWPFKVIEKGNKPAIEVEFKGETKQFIPEEIS?120

SMVLVKMRETAEAYLGGTVNNAVITVPAYFNDSQRQATKDSGLIAGLNVLRIINEPTAAA?180

IAYGLDKKGGAGERNVLIFDLGGGTFDVSLLTIEEGIFEVKSTAGDTHLGGEDFDNRLVN?240

HFVKEFKRKHKKDLTTNARALRRLRTSCERAKRTLSSAAQTSIEIDSLFEGIDFYTSITR?300

ARFEELCADLFRSTMEPVERVLRDAKTDKSSVNEIVLVGGSTRIPKIQRLVADFFNKDPN?360

KSINPDEAIAYGAAVQASILSGDTSSKSTNEILLLDVAPLSLGIETAGGVMTALIKRDTT?420

IPTRSPRLSLPTPTTSLVSRFRSTRVSVLAPRTTTSLVSSSSPVSPCSSWCSSDRGHFDV?480

DANGIMNVGAVEKGTGKTNKITITNDKGRLSKEEIERMLAEAEKYKAEDEAEAARIHAKN?540

GPESYAYSLRNTVNEGKLSISDSDKEKLRARLTRLSTGSTTTRPPARRSTTLNRRSSRVL?600

PTPSFWLPTVVLAVVVPPLVVTPVLVALVVLTRLRSALRSLTKKVFNGVFLFPVLFDVS??659