[發明專利]一種適用于天然產物高通量篩選的化合物庫高效制備方法

有效

• 申請號: 201310032626.6
• 申請日: 2013-01-28
• 公開（公告）號: CN103487531A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 李萍;陳君;張慧;羅麗平;宋慧鵬;周萍
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 北京市浩天知識產權代理事務所 11276
• 代理人: 劉云貴

1.一種適用于天然產物高通量篩選的化合物庫高效制備方法，其特征在于，包括下述步驟：

a）選取一種天然產物作為分析對象；

b）采用常規分析型液相色譜系統與自動組分收集系統聯用，建立上述分析對象的全成分色譜指紋圖譜分析條件；

c）運行步驟b）中的色譜指紋圖譜分析條件，通過軟件設置各指紋峰的起始時間和結束時間以及收集位置，使組分收集系統的程序根據上述設置，自動、精確地收集各指紋峰；

d）針對每個指紋峰，分別運行1~2次餾分收集程序；

e）將每個餾分經簡單的脫溶劑處理獲得微量樣品；以及

f）從分析對象制備所得的所有微量樣品即構成了一個供高通量篩選的化合物庫。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟a）中的天然產物是天然來源的植物、動物、微生物、海洋生物、中藥復方的提取物或由其活性導向分離得到的提取物部位。

3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟b）中的常規分析型液相色譜系統的色譜條件如下：分離采用的色譜柱內徑≤10mm、粒徑≤5μm；流速為0.5-5mL/min，分析時間≤3h。

4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟b）中的色譜指紋圖譜重現性好，各色譜峰的保留時間前后一致，其中大部分色譜峰的分離度大于1.5。

5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟c）中的軟件用來聯結并控制常規分析型液相色譜系統和自動組分收集系統，使得兩個系統之間信號傳遞與進樣器同步，并控制組分收集器，實現按單個色譜峰分別進行收集；該步驟中所使用的檢測器為紫外檢測器、示差折光檢測器或分流串接的蒸發光散射檢測器、質譜檢測器。

6.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟c）中的軟件設置是以指紋圖譜的每個指紋峰的實際出峰時間為依據，單個色譜峰的收集是通過編輯餾分收集端的該指紋峰的起始時間和結束時間實現的。

7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟e）中的每個餾分的純度高，以含有單個化合物為主，大多數色譜峰純度高于95%。

8.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟f）的供高通量篩選的化合物庫適用于細胞、細胞器、蛋白質水平的快速活性篩選；其中化合物庫含有幾十個至上百個微量樣品。