[發(fā)明專利]一種用氣味結(jié)合蛋白15基因檢測(cè)昆蟲自殘率的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310032095.0
• 申請(qǐng)日: 2013-01-28
• 公開（公告）號(hào): CN103060467A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄒德玉;陳紅印;張禮生;王樹英;陳長(zhǎng)風(fēng);王孟卿;劉晨曦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/12;C07K14/435
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.用于檢測(cè)氣味結(jié)合蛋白15編碼基因表達(dá)量的物質(zhì)在檢測(cè)昆蟲自殘率中的應(yīng)用；

所述氣味結(jié)合蛋白15的氨基酸序列為序列表中的序列2。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述昆蟲為昆蟲個(gè)體或昆蟲種群；所述氣味結(jié)合蛋白15編碼基因的核苷酸序列為序列表中的序列1或序列表中的序列1自5’末端第10-273位核苷酸；

所述昆蟲具體為蠋蝽。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述用于檢測(cè)氣味結(jié)合蛋白15編碼基因表達(dá)量的物質(zhì)為如下1）-3）中任意一種：

1）引物對(duì)A：所述引物對(duì)由引物1和引物2組成；所述引物1的核苷酸序列為序列表中序列3；所述引物2的核苷酸序列為序列表中序列4；

2）含有所述引物對(duì)A的RT-PCR試劑；

3）含有所述引物對(duì)A或所述RT-PCR試劑的試劑盒。

4.一種引物對(duì)A，由引物1和引物2組成；

所述引物1的核苷酸序列為序列表中序列3；所述引物2的核苷酸序列為序列表中序列4。

5.含有權(quán)利要求4所述的引物對(duì)A的RT-PCR試劑；所述RT-PCR試劑具體由水、RT-PCR擴(kuò)增緩沖液、鎂離子、dNTPs、權(quán)利要求4所述的引物對(duì)A、SYBR和Taq酶組成；

所述引物對(duì)A中的各條引物在所述RT-PCR試劑中的終濃度具體為0.2-1μM，所述引物對(duì)A中的各條引物在所述RT-PCR試劑中的終濃度進(jìn)一步具體為0.25μM。

6.含有權(quán)利要求4所述的引物對(duì)A或權(quán)利要求5所述的RT-PCR試劑的試劑盒。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括內(nèi)參引物對(duì)B，所述內(nèi)參引物對(duì)B由引物3和引物4組成；所述引物3的核苷酸序列為序列表中的序列6；所述引物4的核苷酸序列為序列表中的序列7。

8.一種檢測(cè)昆蟲自殘率的方法，包括如下步驟：用權(quán)利要求4所述的引物對(duì)A或權(quán)利要求5所述的RT-PCR試劑或權(quán)利要求6或7所述的試劑盒對(duì)待測(cè)的昆蟲A和B進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增；若所述昆蟲A的氣味結(jié)合蛋白15基因的表達(dá)量高于所述昆蟲B，則所述昆蟲A的自殘率低于所述昆蟲B。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：

所述昆蟲為昆蟲個(gè)體或昆蟲種群；

所述RT-PCR擴(kuò)增的模板為昆蟲的cDNA；

所述昆蟲具體為蠋蝽。

10.一種蛋白或其編碼基因：

所述蛋白的氨基酸序列為序列表中的序列2；

所述蛋白的編碼基因的核苷酸序列為序列表中的序列1或序列表中的序列1自5’末端第10-273位核苷酸。