[發明專利]一種用防御素基因檢測昆蟲自殘率的方法

有效

• 申請號: 201310032089.5
• 申請日: 2013-01-28
• 公開（公告）號: CN103060466A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 鄒德玉;陳紅印;張禮生;王樹英;陳長風;王孟卿;劉晨曦
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C07K14/435;C12N15/12
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.用于檢測類防御素蛋白編碼基因表達量的物質在檢測昆蟲自殘率中的應用；

所述類防御素蛋白的氨基酸序列為序列表中的序列2。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述昆蟲為昆蟲個體或昆蟲種群；所述類防御素蛋白編碼基因的核苷酸序列為序列表中的序列1或序列表中的序列1自5’末端第81-272位核苷酸；

所述昆蟲具體為蠋蝽。

3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于：所述用于檢測類防御素蛋白編碼基因表達量的物質為如下1）-3）中任意一種：

1）引物對A：所述引物對由引物1和引物2組成；所述引物1的核苷酸序列為序列表中序列3；所述引物2的核苷酸序列為序列表中序列4；

2）含有所述引物對A的RT-PCR試劑；

3）含有所述引物對A或所述RT-PCR試劑的試劑盒。

4.一種引物對A，由引物1和引物2組成；

所述引物1的核苷酸序列為序列表中序列3；所述引物2的核苷酸序列為序列表中序列4。

5.含有權利要求4所述的引物對A的RT-PCR試劑；所述RT-PCR試劑具體由水、RT-PCR擴增緩沖液、鎂離子、dNTPs、權利要求4所述的引物對A、熒光染料和Taq酶組成；

所述引物對A中的各條引物在所述RT-PCR試劑中的終濃度具體為0.2-1μM，所述引物對A中的各條引物在所述RT-PCR試劑中的終濃度進一步具體為0.25μM。

6.含有權利要求4所述的引物對A或權利要求5所述的RT-PCR試劑的試劑盒。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括內參引物對B，所述內參引物對B由引物3和引物4組成；所述引物3的核苷酸序列為序列表中的序列6；所述引物4的核苷酸序列為序列表中的序列7。

8.一種檢測昆蟲自殘率的方法，包括如下步驟：用權利要求4所述的引物對A或權利要求5所述的RT-PCR試劑或權利要求6或7所述的試劑盒對待測的昆蟲A和B進行RT-PCR擴增；

若所述昆蟲A的類防御素蛋白基因的表達量高于所述昆蟲B，則所述昆蟲A的自殘率低于所述昆蟲B。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述昆蟲為昆蟲個體或昆蟲種群；所述RT-PCR擴增的模板為昆蟲cDNA；

所述昆蟲為蠋蝽。

10.一種蛋白或其編碼基因：

所述蛋白的氨基酸序列為序列表中的序列2；

所述蛋白的編碼基因的核苷酸序列為序列表中的序列1或序列表中的序列1自5’末端第81-272位核苷酸。