[發明專利]一種液相層析的洗脫方法及其檢驗設備

在審

• 申請號: 201310031435.8
• 申請日: 2013-01-29
• 公開（公告）號: CN103969375A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 徐巖;劉先成;彭國慶;胡文雍;梅林祥
• 申請（專利權）人: 深圳普門科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及液相層析檢測領域，尤其涉及一種低壓液相離子交換層析檢測糖化血紅蛋白的洗脫方法及其檢驗設備。

背景技術

人體血液中的糖化血紅蛋白最主要的亞組分HbA1c的濃度直接反映糖尿病人三個月的平均血糖水平，該指標是臨床作為糖尿病人的篩查、診斷、治療的重要依據。

目前臨床上采用國際公認的金標準液相層析法來檢測糖化血紅蛋白HbA1c，其中高效液相色譜分析法(HPLC)只采用兩種離子濃度的洗脫方法，即使用一種高離子濃度洗脫液和一種低濃度洗脫液；通過機內設置一個機械式的六通旋轉分配閥來分配生成不同離子濃度的洗脫液，以對樣本中的不同糖化血紅蛋白組分進行洗脫；由于采用機內配比不同濃度洗脫液，帶來儀器的復雜程度增高，故障率增加，洗脫液的交叉污染嚴重，儀器的制造、維修、使用的成本也高。而低壓液相色譜分析法有采用兩種離子濃度的洗脫方法和四種離子濃度的洗脫方法；即分別采用兩種和四種不同離子濃度的洗脫液；這兩種洗脫方法均是通過一個電子隔離閥單獨控制一種離子濃度的洗脫液的方式對樣本不同糖化血紅蛋白組分進行洗脫；兩種洗脫液洗脫分離效果不徹底，直接影響檢測結果的準確性；而四種洗脫液分離效果較兩種洗脫液的好，但是儀器的復雜程度、故障率、儀器的制造、維修和使用的成本都會隨之增加。

發明內容

為了解決以上技術問題，本發明提供了一種液相層析檢測糖化血紅蛋白的洗脫方法及其檢驗設備，可減少洗脫液交叉污染、簡化檢驗設備的結構和檢測程序、提高設備運行可靠性、降低設備成本。

本發明提供一種液相層析的洗脫方法，包括以下幾個步驟：

步驟(1)：配置三種離子濃度的洗脫液；

步驟(2)：將所述三種離子濃度的洗脫液對吸附有待測樣本的離子交換樹脂進行洗脫；

步驟(3)：對所述被洗脫后的液體進行色譜分析，確定被洗脫成份的含量；

步驟(4)：確定糖化血紅蛋白HbA1c的濃度。

本發明還提供了一種用于液相層析檢測糖化血紅蛋白的洗脫方法，所述洗脫液包括：

用于樹脂清洗、平衡和洗脫糖化血紅蛋白HbA1a和HbA1b的洗脫液A，所述洗脫液A按重量百分比，包括：NaH2PO4 0.178-0.186％，Na2HPO40.056-0.076％，NaCl 0.116-0.120％，KCl 0.024-0.026％，NaN3 0.039-0.041％，余量為去離子水；

用于洗脫糖化血紅蛋白HbA1c的洗脫液B，所述洗脫液B按重量百分比，包括：NaH2PO4 0.148-0.168％、Na2HPO4 0.054-0.060％、NaCl 0.584-0.596％、KCl 0.040-0.044％、NaN3 0.039-0.041％、余量為去離子水；

用于洗脫非糖化血紅蛋白HbA0及樹脂的再生的洗脫液C，所述洗脫液C按重量百分比，包括：NaH2PO4 0.141-0.143％、Na2HPO4 0.082-0.088％、NaCl 1.479-1.619％、NaN3 0.039-0.041％、余量為去離子水。

本發明還提供了一種用于液相層析檢測糖化血紅蛋白的檢驗設備，包括：

控制裝置，用于發出指令控制采樣系統；

采樣裝置，開始進行樣本采樣，并將采樣樣本放置到混育杯中進行溶血；

蠕動泵，用于提供管路中液體流動所需動力；

電子隔離閥，用于切換待測樣本、洗脫液A、洗脫液B和洗脫液C；

檢測裝置，包括光度計、層析柱和比色池，當樣本通過層析柱進入比色池后，光度計進行電壓采樣。

一種采用該設備的用于液相層析檢測糖化血紅蛋白的洗脫方法，包括以下幾個步驟：

步驟(1)：控制裝置發出指令控制采樣裝置開始進行采樣，放置到混育杯中進行溶血；

步驟(2)：控制裝置發出指令使蠕動泵運轉，并對電子隔離閥發出指令，分別切換樣本、洗脫液A、洗脫液B和洗脫液C；

步驟(3)：控制裝置實時對層析柱的溫度進行監視控制，當樣本通過層析柱進入比色池后，光度計進行電壓采樣并返回給控制裝置。

優選的，還包括：所有的參數在顯示屏上顯示，當完成測試后，控制裝置通過電壓值的計算最終得出測量結果。

優選的，蠕動泵包括第一蠕動泵和第二蠕動泵，所述第一蠕動泵的轉速大于所述第二蠕動泵的轉速。