[發明專利]包含一種或多種可組合的突變的芽孢桿菌屬枯草桿菌蛋白酶

無效

• 申請號: 201310031350.X
• 申請日: 2009-11-10
• 公開（公告）號: CN103122345A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: L·G·卡斯康-佩雷拉;D·A·埃斯特爾;J·T·小凱利斯
• 申請（專利權）人: 丹尼斯科美國公司
• 主分類號: C12N9/56
• 分類號: C12N9/56;C12N15/57;C12N15/63;C11D3/386
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

1.芽孢桿菌屬枯草桿菌蛋白酶的分離的枯草桿菌蛋白酶變體，其中所述枯草桿菌蛋白酶變體是具有蛋白水解活性的成熟形式，并包含在選自24、45、101、109、118、213和217的兩個或多個位置處的替換，其中所述位置通過對應于如SEQ?ID?NO：1所述的解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)枯草桿菌蛋白酶BPN’的氨基酸序列而進行編號。

2.權利要求1所述的分離的枯草桿菌蛋白酶變體，其中所述枯草桿菌蛋白酶變體具有大于或等于0.5的相對蛋白質表達水平性能指數(TCA?PI)和/或去污活性性能指數(BMI?PI)。

3.權利要求1或2所述的分離的枯草桿菌蛋白酶變體，其中所述芽孢桿菌屬枯草桿菌蛋白酶是FNA，并且其中所述替換在選自S24Q、S24E、S24L、S24R、A45Q、A45E、A45L、A45R、S101Q、S101E、S101L、S101R、N109Q、N109E、N109L、N109R、K213Q、K213E、K213L、K213R、L217Q、L217E的兩個或多個位置處，其中所述位置對應于SEQ?ID?NO：1的BPN’枯草桿菌蛋白酶的位置。

4.權利要求1、2或3中任一項所述的分離的枯草桿菌蛋白酶變體，其中所述芽孢桿菌屬枯草桿菌蛋白酶是FNA，且其中所述替換在選自A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24Q-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，N109Q-N118Q-K213Q，N118Q-K213Q，S24E-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109Q-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109E-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213E，S24L-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109Q-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109L-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109L-N118L-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109L-N118L-K213L，S24R-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24R-A45R-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24RA45R-S101R-N109Q-N118Q-K213Q，S24R-A45R-S101R-N109R-N118Q-K213Q，S24R-A45R-S101R-N109R-N118R-K213Q，S24R-A45R-S101R-N109R-N118R-K213R，S24E-A45R-S101R-N109R-N118R-K213R，S24E-A45E-S101R-N109R-N118R-K213R，S24E-A45E-S101E-N109R-N118R-K213R，S24E-A45E-S101E-N109E-N118R-K213R，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213R，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213E，S24Q-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q-L217Q，和S24Q-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q-L217E的兩個或多個位置處，其中所述位置對應于SEQ?ID?NO：1的BPN’枯草桿菌蛋白酶的位置。

5.在另外的實施方案中，所述蛋白酶變體是具有蛋白水解活性的芽孢桿菌屬枯草桿菌蛋白酶FNA的分離的枯草桿菌蛋白酶變體的成熟形式，并且包含替換K213Q，其中所述位置通過對應于如SEQ?ID?NO：1所述的解淀粉芽孢桿菌枯草桿菌蛋白酶BPN’的氨基酸序列而進行編號。

6.分離的核酸，其編碼如權利要求1-5中任一項所述的枯草桿菌蛋白酶變體。

7.表達載體，其包含權利要求6所述的核酸。

8.宿主細胞，其包含如權利要求7所述的表達載體。