[發明專利]利用[Co(NH3)6]3+-DNA共振光散射探針定量檢測蛋白質的方法無效
| 申請號： | 201310031130.7 | 申請日： | 2013-01-15 |
| 公開（公告）號： | CN103149179A | 公開（公告）日： | 2013-06-12 |
| 發明（設計）人： | 李艷坤 | 申請（專利權）人： | 華北電力大學(保定) |
| 主分類號： | G01N21/51 | 分類號： | G01N21/51 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 071003 河北省保定市*** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 利用 co nh sub sup dna 共振 散射 探針 定量 檢測 蛋白質 方法 | ||
1.一種利用[Co(NH3)6]3+-DNA共振光散射探針定量檢測蛋白質的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)依次加入小牛胸腺ctDNA溶液、Britton-Robinson(BR)緩沖溶液、[Co(NH3)6]Cl3溶液，最后分別加入1組已知濃度的標準組蛋白質溶液，和待測的未知濃度的實驗組蛋白質溶液，各個混合溶液搖勻稀釋；
(2)步驟(1)所得的各混合溶液分別放置1小時后，在200.0nm～700.0nm下進行同步熒光掃描，獲得其共振光散射光譜，并在346.0nm處測定共振光散射強度；
(3)結合標準組蛋白質溶液的濃度(C)與其增強的共振光散射強度(ΔI)繪制標準曲線，得到ΔI與C之間的線性回歸方程，以及該方法測量蛋白質的線性范圍；
(4)根據測量蛋白質標準曲線的回歸方程和實驗組蛋白質溶液增強的共振光散射強度，計算實驗組蛋白質溶液的濃度。
2.權利要求1所述利用[Co(NH3)6]3+-DNA共振光散射探針檢測蛋白質的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，混合試劑的用量比為DNA∶BR緩沖液∶[Co(NH3)6]Cl3＝(7μg∶1.5mL∶10-4mmol)/10mL。
3.權利要求1所述利用[Co(NH3)6]3+-DNA共振光散射探針檢測蛋白質的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，采用pH為3.78的Britton-Robinson緩沖溶液控制待測溶液的酸度。
4.權利要求1所述利用[Co(NH3)6]3+-DNA共振光散射探針檢測蛋白質的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所加入幾種試劑的次序，以及每加入一種試劑都將體系旋渦混合均勻。
5.權利要求1所述利用[Co(NH3)6]3+-DNA共振光散射探針檢測蛋白質的方法，其特征在于，驗證了該發明方法可以應用于牛血清白蛋白、人血清白蛋白、胰島素、明膠、雞蛋白、γ-球蛋白，以及人血清樣本中總蛋白含量的檢測。
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