[發明專利]一種用于中藥批次一致性的判斷方法

有效

• 申請號: 201310028607.6
• 申請日: 2013-01-25
• 公開（公告）號: CN103115973A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 聶磊;臧恒昌;曾英姿;王培;段曉菊;姜紅
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 彭成

1.一種用于中藥各批次樣本一致性的判斷方法，其特征在于：步驟如下：

（1）擇取待判斷的多個不同批次的中藥樣品，研磨后，采用適合提取該中藥有效成分的溶劑提取，獲得提取液；

（2）采用高效液相色譜儀在適合該中藥的檢測波長處采集上述不同批次的中藥樣品的提取液的原始高效液相色譜指紋圖譜；

（3）將上述所得的HPLC指紋圖譜進行方法學驗證，使所測定的HPLC指紋圖譜符合指紋圖譜技術規范要求；然后計算各批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜的平均圖譜作為對照圖譜；分別計算各批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜與對照圖譜的相似度；若相似度r大于等于0.900，則保留，若r<0.900，則將其剔除，然后重新計算剩余批次的中藥樣品的對照圖譜，及剩余各批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜與剩余批次的中藥樣品的對照圖譜的相似度，然后再采用與上述相同的標準考察相似度；重復該過程，直到其符合要求；

（4）從上述選擇后剩余的批次中選擇有效成分含量高的樣品的HPLC指紋圖譜作為參考，選擇與參考樣品的HPLC指紋圖譜歐氏距離最近的多個批次的中藥樣品，然后與參考樣品構建參考類別，并計算參考類別樣品的平均指紋圖譜，即參考圖譜；

（5）基于上述參考類別，計算各批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜與參考圖譜的馬氏距離，然后將馬氏距離轉化為F檢驗，從而判斷不同批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜與參考圖譜之間在一定概率水平下是否有顯著差異；

（6）找出馬氏距離判定為有顯著性差異的那些批次的中藥樣品，采用t檢驗將這些批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜的共有峰與參考類別各批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜的共有峰進行檢驗，判斷共有峰中各色譜峰面積在一定概率水平下是否有顯著性差異；判斷為有顯著性差異的色譜峰，表明該批次的中藥樣品中，在該色譜峰所表示的有效成分含量上明顯低于或高于參考類別的中藥樣品的相應成分的平均含量。

2.根據權利要求1所述的一種用于中藥各批次樣本一致性的判斷方法，其特征在于：所述步驟（4）具體如下：選擇有效成分含量高的批次樣品的HPLC指紋圖譜作為參考，計算其它各批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜與參考樣品的HPLC指紋圖譜的歐氏距離，根據歐氏距離由小到大將其它各批次的中藥樣品進行排列，選擇與參考樣品的HPLC指紋圖譜歐氏距離最近的多個批次的中藥樣品，并與參考樣品構建參考類別，并計算參考圖譜。

3.根據權利要求1所述的一種用于中藥各批次樣本一致性的判斷方法，其特征在于：所述步驟（5）中，判斷各批次的中藥樣品的一致性優劣是基于馬氏距離給出的概率值確定的；在計算馬氏距離之前，先將參考類別的中藥樣品的HPLC指紋圖譜數據進行主成分分析；根據主成分數確定得分向量，進而計算馬氏距離；然后將馬氏距離通過F檢驗給出相應概率值P，若某批次的中藥樣品的P<0.05，α=0.05，則判斷該批次的中藥樣品的HPLC指紋圖譜與參考圖譜有顯著差異，表示該批次樣品與參考類別的中藥樣品一致性存在顯著性差異；若無顯著差異，則判斷該批次的中藥樣品與參考類別的中藥樣品為同一類別的批次樣品，一致性無顯著性差異。