[發明專利]一種快速篩選耐低溫草菇菌種的方法

無效

• 申請號: 201310028065.2
• 申請日: 2013-01-25
• 公開（公告）號: CN103081721A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 陳明杰;趙妍;姜威;鮑大鵬;汪虹;周慧敏;李亞鵬
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

技術領域

本發明屬于篩選菌種領域，特別涉及一種快速篩選耐低溫草菇菌種的方法。

背景技術

草菇（Volvariella?volvacea(Bull?ex?Fr.)Sing）屬擔子菌綱，傘菌目，光柄菇科，小包腳菇屬。其味道鮮美，營養豐富，是食用菌中的優質菇種。據研究報道，鮮草菇含水92.39％，蛋白質2.66％，脂肪2.24％，還原糖1.66％，轉化糖0.95％，灰分0.91％；在草菇蛋白質中含有18種氨基酸，包含人體所不能合成的8種必需氨基酸。除食用價值外，草菇還具有提高人體免疫力、抑制癌細胞生長、解毒等功效。因此，草菇深受人們的喜愛，一直是我國的出口創匯產品，遠銷至美國、加拿大、英國、日本、新加坡、馬來西亞等國家和地區。

草菇原產于熱帶與亞熱帶地區，菌絲體最適宜的生長溫度為32～35℃，子實體分化發育的最適宜溫度為27～31℃，這種高溫的環境要求大大限制了草菇的發展，使得選/培育耐低溫的草菇菌種成為當前研究的熱點。通常檢驗育種材料的耐低溫特性，需要經過多次重復出菇試驗才能確定，而每次出菇試驗都要經歷母種—原種—栽培種等一系列過程，才能最終獲得子實體。如果毫無預先篩選的大規模出菇，存在工作量大，能源消耗高，周期長，不穩定等缺點。因此，本發明提供一種在出菇試驗前先篩選鑒定草菇耐低溫菌種的簡便方法，可大大提高耐低溫草菇菌種的選育效率。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種快速篩選耐低溫草菇菌種的方法，該方法所需時間短，效率高，只需要1-5天便獲得結果，適于草菇耐低溫育種中大批量的檢測鑒定，而常規的方法檢測需要40d左右，其操作也較為繁瑣；該方法簡單易行，所需設備與藥品常規，成本低；該鑒定檢測可靠性高，可操作性強，檢測技術經過簡單培訓即可完成整個試驗過程。

本發明的一種快速篩選耐低溫草菇菌種的方法，包括：

（1）按配比180-220g/L:18-22g/L:15-20g/L，將馬鈴薯（取汁）、葡萄糖以及瓊脂，加入蒸餾水中，混合均勻，在121℃條件下，滅菌20-30min，然后冷卻至45-50℃，倒入已滅菌的培養皿中，凝固，得固體培養基；

（2）在無菌條件下，將草菇菌種接入上述固體培養基中，在黑暗條件下，溫度為32-35℃，培養18-24h后，在0-4℃冷藏處理2-10h，然后在32-35℃，恢復培養1-5d，恢復培養期間，每隔6-8h畫線一次，選擇恢復速度快、菌絲生長活力強的菌株，即為耐低溫草菇菌株。

所述步驟（1）中培養皿直徑為9-12cm。

所述步驟（1）中培養基的倒入量是培養皿容積的30%-50%。

所述步驟（2）中草菇菌種的菌絲潔白、健壯。

所述步驟（2）中冷藏溫度優選為0℃。

所述步驟（2）中冷藏時間優選為6-10h。

所述步驟（2）中恢復培養的溫度優選為32℃。

所述步驟（2）中恢復培養時間優選為3d。

馬鈴薯取汁的具體操作為：挑選馬鈴薯，將表面清洗干凈，去皮，稱取。將馬鈴薯切塊，加蒸餾水煮爛（一般煮沸20-30min，能被玻璃棒戳破即可），用四層紗布過濾。

有益效果

（1）本發明方法所需時間短，效率高，只需要1-5d便可獲得結果，適于草菇耐低溫育種中大批量的檢測鑒定，而常規的方法檢測草菇耐低溫性能需要40d左右，其操作也較為繁瑣；

（2）本發明方法簡單易行，所需設備與藥品常規，成本很低；

（3）本發明鑒定檢測可靠性高，可操作性強，檢測技術經過簡單培訓的生手即可完成整個試驗過程。

附圖說明

圖1是培養平皿背面畫“十”字線；

圖2是V23與VH3菌絲在0℃下處理10h后，于32℃下恢復生長72h的情況；

圖3是菌株V23在30℃下常規栽培出菇照片；

圖4是菌株VH3在28℃下常規栽培出菇照片。

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。