[發(fā)明專利]尿微量白蛋白檢測(cè)方法和試劑盒

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310027719.X
• 申請(qǐng)日: 2013-01-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103091316A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫紅霞;唐亞林;楊千帆;管愛(ài)嬌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所
• 主分類號(hào): G01N21/78
• 分類號(hào): G01N21/78;G01N21/80
• 代理公司: 北京弘權(quán)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11363
• 代理人: 郭放;王磊

1.一種檢測(cè)尿微量白蛋白的方法，所述方法包括以下步驟：

（1）用pH5.0～8.2的含有金屬離子的緩沖溶液和微量白蛋白配制尿微量白蛋白濃度不同的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液；

（2）在所述多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入等量的菁染料和含有金屬離子的緩沖溶液，得到多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)比色溶液；

（3）在待測(cè)液體樣品中加入菁染料和含有金屬離子的緩沖溶液，以使待測(cè)樣品中菁染料的濃度以及pH值與標(biāo)準(zhǔn)比色溶液的相同，從而得到測(cè)試溶液；

（4）將測(cè)試溶液與步驟（2）中獲得的標(biāo)準(zhǔn)比色溶液的顏色進(jìn)行對(duì)比，從標(biāo)準(zhǔn)比色溶液中找出與測(cè)試溶液的顏色一致或接近的標(biāo)準(zhǔn)比色溶液，則該標(biāo)準(zhǔn)比色溶液所對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液的尿微量白蛋白濃度與待測(cè)液體的尿微量白蛋白濃度一致或接近。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述菁染料為式I的化合物，

式I

其中：R₁為C₁-C₆的烷基、苯基、烷基取代的苯基；R₂、R₃、R₄和R₅獨(dú)立地選自H或C₁-C₆的烷基，或者R₂和R₃與它們所連接的碳原子一起形成5元至7元的環(huán)結(jié)構(gòu)，或者R₄和R₅與它們所連接的碳原子一起形成5元至7元的環(huán)結(jié)構(gòu)；R₆和R₇為C₁-C₆烷基或者磺酸基取代的C₁-C₆烷基；Y為反離子，根據(jù)R₆和R₇所帶電荷的不同而不同，若R₆和R₇為烷基，則Y為鹵素陰離子；若R₆和R₇只有一個(gè)帶有磺酸根，則無(wú)需Y作為反離子；若R₆和R₇均帶有磺酸根，則Y為三乙胺陽(yáng)離子；X₁，X₂獨(dú)立地選自C、O、S、Se或Te。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述C₁-C₆的烷基選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、正己基或異己基。

4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中R₁選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、正己基、異己基、苯基、甲基苯基或二甲基苯基；R₂、R₃、R₄和R₅獨(dú)立地選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、正己基或異己基。

5.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述5元至7元環(huán)結(jié)構(gòu)為含有或不含有N或S原子的飽和或不飽和環(huán)結(jié)構(gòu)。

6.如權(quán)利要求2所述的方法，其中Y選自氟、氯、溴、碘陰離子或三乙胺陽(yáng)離子。

7.如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述含有金屬離子的緩沖液選自磷酸鉀-磷酸氫鉀緩沖液、磷酸鈉-磷酸氫鈉緩沖液、巴比妥鈉-鹽酸緩沖液、巴比妥鉀-鹽酸緩沖液、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、檸檬酸-檸檬酸鉀緩沖液、甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液、硼砂-氫氧化鈉緩沖液或磷酸鈉緩沖液或者添加有水溶性金屬鹽的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液、三乙醇胺緩沖液、咪唑-鹽酸緩沖液、雙甘氨肽緩沖液、2-氨基-2-甲基-1-丙醇緩沖液；所述緩沖液的緩沖劑濃度在1～50mmol/L的范圍。

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述水溶性金屬鹽為水溶性的堿金屬鹽或堿土金屬鹽；所述水溶性金屬鹽在緩沖溶液中的濃度在1～50mmol/L的范圍。

9.如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中尿微量白蛋白濃度在0至1000mg/L的范圍，優(yōu)選在0~600mg/L的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選在0~400mg/L的范圍；所述菁染料在所述標(biāo)準(zhǔn)比色溶液中的濃度在1至30μmol/L的范圍，優(yōu)選在3~20μmol/L的范圍。