[發明專利]一種Bt cry54Ab1操縱子基因及其編碼蛋白和應用

在審

• 申請號: 201310026076.7
• 申請日: 2013-01-23
• 公開（公告）號: CN103103204A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 鄭愛萍;李平;關鵬;余宗蘭;朱軍;鄧其明;李雙成
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N15/32
• 分類號: C12N15/32;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C07K14/325;A01H5/00;A01N47/44;A01P7/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.一種Bt?cry54Ab1操縱子基因，其特征在于，所述cry54Ab1操縱子基因包括一個cry54Ab1基因、一個orf2基因以及它們之間的非編碼間隔區，所述cry54Ab1操縱子基因具有（1）或（2）所示的核苷酸序列：

（1）SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列；

（2）SEQ?ID?No.1所示的核苷酸序列經取代、缺失或添加一個或幾個核苷酸且表達相同功能蛋白質的核苷酸序列。

2.權利要求1所述操縱子基因編碼的蛋白。

3.根據權利要求2所述的蛋白，其特征在于，所述蛋白為一種Bt蛋白Cry54Ab1+Orf2，其包括蛋白Cry54Ab1和蛋白Orf2，蛋白Cry54Ab1的氨基酸序列如SEQ?ID?No.4所示，蛋白Orf2的氨基酸序列如SEQ?ID?No.5所示，蛋白Orf2為蛋白Cry54Ab1的分子伴侶。

4.含有權利要求1所述cry54Ab1操縱子基因的重組表達載體。

5.根據權利要求4所述的重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體為pSTK-cry54Ab1-orf2。

6.根據權利要求5所述的重組表達載體，其特征在于，構建所述重組表達載體過程中擴增cry54Ab1操縱子基因所用引物為：

引物CO-F：5’-GCCGGATCCGATGTACAGGTGGGTTCTTGTTAAAC-3’；

引物CO-R：5’-CGCGTCGACCTAACTATAATTGCTATCATAGC-3’。

7.含有權利要求4-6任一項所述重組表達載體的宿主細胞。

8.含有權利要求2或3所述蛋白的殺蟲劑。

9.權利要求1所述的cry54Ab1操縱子基因或權利要求3所述的Bt蛋白Cry54Ab1+Orf2在提高轉基因植物抗蟲性中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述應用為將cry54Ab1操縱子基因與表達載體連接，得到能夠表達Bt蛋白Cry54Ab1+Orf2的重組表達載體，再通過轉基因方法將所述重組表達載體導入植物，得到含有Cry54Ab1操縱子基因的轉化體，表達Bt蛋白Cry54Ab1+Orf2，提高植物抗蟲性。