[發明專利]一種海洋芽孢桿菌及利用該菌生產過氧化氫酶的方法

有效

• 申請號: 201310022577.8
• 申請日: 2013-01-21
• 公開（公告）號: CN103060244A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 霍穎異;許學偉;王春生;吳敏;張心齊;潘杰
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第二海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/08;C12R1/01
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 徐飛虎;徐關壽

1.一種過氧化氫酶產酶菌，分類命名為伊平屋海嶺海洋芽孢桿菌（Oceanobacillus?iheyensis），保藏編號為CGMCC?No.6042。

2.根據權利要求1所述的過氧化氫酶產酶菌，所述菌株具有以下特征：

（1）菌落形態：菌落呈圓形，表面光滑，邊緣平整，微凸起，乳白色；

（2）細胞形態：革蘭氏陽性菌，細胞顯微鏡下呈現運動性，形態為桿狀；

（3）生理生化特征：好氧生長；氧化酶陽性；水解七葉苷、吐溫40或吐溫60，不水解吐溫80、DNA或尿素；不產吲哚；能利用葡萄糖、甘露糖、果糖或麥芽糖產酸，不能利用阿拉伯糖或鼠李糖產酸；對阿莫西林、氨芐青霉素、氯霉素、紅霉素、新生霉素或盤尼西林G敏感，對制霉素不敏感。

3.根據權利要求1所述的過氧化氫酶產酶菌，其特征在于：所述菌株的16SrRNA基因包含如Seq?ID?No.1所示的核苷酸序列。

4.一種利用權利要求1所述的菌株生產過氧化氫酶的方法，包括以下步驟：

（1）將菌株CGMCC?No.6042接種至天然海水液體培養基，培養后加入過氧化氫刺激培養作為種子液；

（2）將種子液轉接至發酵培養基中進行發酵培養，培養后加入過氧化氫刺激培養，即得到具有過氧化氫酶活性的發酵液。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述方法步驟（1）中的天然海水培養基的配方為天然海水中加入0.1-0.5%的蛋白胨、0.01-0.05%的酵母提取物以及0.1-0.5%的酪蛋白氨基酸，調節pH為6.8-7.5。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述方法步驟（2）中的發酵培養基配方為天然海水中加入0.1-1%的酵母抽提物和0.5-5%的蛋白胨，pH為6.5-7.5。

7.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述方法步驟（2）中細菌培養結束后加入1-10mM的過氧化氫刺激培養1-10小時。

8.根據權利要求4-7任一項所述的方法，其特征在于：所述方法步驟（2）獲得發酵液中的過氧化氫酶活力為1000-10000U/mg。

9.根據權利要求4-7任一項所述的方法，其特征在于：根據需要，可任選對具有酶活力的發酵液進行處理，從中分離純化出過氧化氫酶產物。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述處理方法的分離純化條件為離子交換層析、反相層析、疏水層析、分子篩層析或其組合。