[發(fā)明專利]早開堇菜組織培養(yǎng)及快速繁殖的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310020747.9
• 申請日: 2013-01-21
• 公開（公告）號: CN103004611A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張帆;萬雪琴;劉敏;鐘宇;劉光立;張雙;羅兵;黃金亮;吳富雨
• 申請（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物組織培養(yǎng)及快速繁殖的方法，屬于植物組培工廠化快速育苗的方法技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

早開堇菜(?V?iola?prionantha?Bunge)?為堇菜科堇菜屬多年生草本植物。其返青早，生長迅速，覆蓋地面能力強，花期集中，一年內(nèi)春秋兩季均可開花，抑制雜草能力較強，作為早春野生開花地被植物，有較好的觀賞效果及園林應(yīng)用價值。

同時早開堇菜具有較高的藥用價值，民間廣泛用于癰疽瘡毒、毒蛇咬傷等,它具有較強的抗菌、消炎、清熱解毒作用。

早開堇菜主要靠種子繁殖和根狀莖繁殖，但是兩種繁殖方式的繁殖率都比較低，不能滿足作為地被植物用量大的需求。種子在萌發(fā)過程中對溫度十分敏感，最適發(fā)芽溫度為25℃,?在高溫下(>30℃)種子變褐色并霉?fàn)€,?在低溫下(<20℃)萌發(fā)及生長緩慢或停止生長,?這都限制了早開堇菜的大量繁殖。

早開堇菜作為野生地被植物，尚未得到開發(fā)，藥源以采挖野生資源為主，資源漸少，目前早開堇菜的組織培養(yǎng)尚未見報道，單純的靠野生資源并不能滿足需要。因此進行早開堇菜組織快繁體系研究具有很好的發(fā)展前景，不但能夠及時保護發(fā)展這一野生資源，實現(xiàn)可持續(xù)利用；而且還能通過組織培養(yǎng)的快速繁殖滿足城市園林綠化對地被植物需求量大的要求。早開堇菜作為早春地被植物被廣泛應(yīng)用于我國城市園林綠化之中，將進一步豐富我國的地被植物景觀。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種早開堇菜組織培養(yǎng)及快速繁殖的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

早開堇菜組織培養(yǎng)及快速繁殖的方法，其關(guān)鍵方法參數(shù)如下：

1.1?早開堇菜外植體最佳滅菌方式

1.1.1?子葉節(jié)最佳的消毒方式是75%乙醇消毒30s，0.1%升汞消毒時間在4min。

1.1.2?葉片和葉柄最佳的消毒方式是75%乙醇消毒30s、0.1%升汞消毒8min。

1.2?初代培養(yǎng)

1.2.1?在光照培養(yǎng)條件下，早開堇菜子葉節(jié)誘導(dǎo)叢生芽的最適培養(yǎng)基為?MS?+?6-BA?3.0mg·L^-1?+?NAA?0.2?mg·L^-1?；葉柄誘導(dǎo)不定芽的最適培養(yǎng)基為：MS?+?6-BA?3.5mg·L^-1?+?NAA?0.2?mg·L^-1，葉片不適合作為直接誘導(dǎo)不定芽的外植體。

1.2.2?三種外植體均能誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，子葉節(jié)誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織的時間最短，其次為葉柄，葉片最晚。

1.2.3?子葉節(jié)、葉片、葉柄誘導(dǎo)愈傷組織的最適植物生長調(diào)節(jié)劑組合為?MS?+?6-BA?1.5?mg·L^-1?+?2,4-D?1.5?mg·L^-1；

1.3?繼代培養(yǎng)

1.3.1?叢生芽和不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基為：MS?+?6-BA?3.5?mg·L^-1?+?NAA?0.2?mg·L^-1。

1.3.2?三種外植體愈傷組織繼代增殖培養(yǎng)的最優(yōu)組合是?MS?+?6-BA?1.5?mg·L^-1??+?2,4-D?0.75?mg·L^-1??+?NAA?1.0?mg·L^-1，

1.3.3早開堇菜愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基為：MS?+?6-BA?3.0?mg·L^-1?+?NAA?0.3?mg·L^-1；

1.4?生根培養(yǎng)

將在不添加任何激素的MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)15天后的試管苗進行生根培養(yǎng)，最適合早開堇菜幼苗生根的培養(yǎng)基為：1/2MS?+?6-BA?1.0?mg·L^-1?。

1.5?煉苗與移栽

煉苗基質(zhì)以珍珠巖:河沙:腐殖質(zhì)以1:2:2的比例效果最好，植株成活率達100%，且植物的長勢良好。

通過本發(fā)明培育出來的早開堇菜繁殖系數(shù)大、適合大規(guī)模生產(chǎn)，能夠解決該物種資源匱乏的問題，實現(xiàn)可持續(xù)利用；此外早開堇菜快速繁殖，短期內(nèi)獲得大量規(guī)格一致的苗木，能夠滿足園林綠化對其需求量大的要求，這對園林、醫(yī)藥都有重大意義。

具體實施方式

以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明進行詳細說明。