[發明專利]一種抗結核多肽的免疫制備方法

有效

• 申請號: 201310018162.3
• 申請日: 2013-01-18
• 公開（公告）號: CN103059134A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 吳建國;鄧兆群;張儒林;楊小鋼;劉君炎;劉勝武;屈雪菊;譚秋萍
• 申請（專利權）人: 武漢輝斯特科技有限公司
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 鐘鋒;喬宇

1.一種抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：它是以卡介苗脂質體皮下注射健康豬，使其進行免疫反應，其中所述的卡介苗脂質體是由卡介苗和免疫增強劑混合而得；取免疫健康豬的脾和淋巴結，去脂肪及粘膜，得待處理物，向待處理物中加入生理鹽水，搗碎制取勻漿；將勻漿于－20～－30℃反復凍融后經超濾膜超濾，得到的濾液為抗結核多肽粗品；再經白細胞粘附抑制實驗檢測得其白細胞粘附抑制率滿足33.9-38%的范圍值要求后，經交聯葡聚糖凝膠層析柱分離純化，冷凍干燥，得到抗結核多肽。

2.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：所述免疫增強劑為不完全弗氏佐劑和卵磷脂、殼聚糖兩者中至少一種的混合，當不完全弗氏佐劑和卵磷脂兩者混合時，兩種的質量比為1:?0.2-2，當不完全弗氏佐劑和殼聚糖兩種混合時，兩者的質量比為1：0.2-1；當不完全弗氏佐劑、卵磷脂和殼聚糖三種混合時，三者的質量比為1：?0.2-1：0.2-0.8。

3.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：所述的卡介苗脂質體為將卡介苗和免疫增強劑按質量比為1：0.7-3.0，混合后超聲處理30-60min而得，其中卡介苗的用量為0.1-0.6mg/Kg豬。

4.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：所述的注射為每10天一次，連續注射3～6次。

5.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：所述的凍融次數為3～7次。

6.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：按重量比計，所述的生理鹽水的用量為待處理物的1～3倍。

7.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：所述超濾膜的孔徑為3000～8000道爾頓。

8.根據權利要求1所述的抗結核多肽的免疫制備方法，其特征在于：所述交聯葡聚糖凝膠層析柱為交聯葡聚糖凝膠Sephadex?G-15層析柱或交聯葡聚糖凝膠Sephadex?G-25層析柱。