[發(fā)明專利]甲醛降解菌及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310016934.X
• 申請日: 2013-01-17
• 公開（公告）號: CN103087952A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 侯太平;陶科;劉崑;趙浩宇;耿宇聰
• 申請（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/34
• 代理公司: 成都希盛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51226
• 代理人: 柯海軍;武森濤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及甲醛降解菌及其用途，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

甲醛作為一種重要的化工原料，廣泛應(yīng)用于塑料、制膠、皮革、染料等行業(yè)，是相關(guān)工業(yè)排放廢水中的主要有害污染物。甲醛具有極高的化學(xué)活性，易發(fā)生加成、還原、聚合反應(yīng)，它易溶于水，同時(shí)也能溶解于多種有機(jī)溶劑，由于其顯著的細(xì)胞毒性、致癌和致畸性，尋求高效防治甲醛污染策略對人類健康和環(huán)境保護(hù)有著重大意義。

目前，處理甲醛廢水的方法主要分為物理化學(xué)處理法和生物處理法兩大類。物理化學(xué)處理法普遍存在成本高、操作復(fù)雜及二次污染等問題，考慮到環(huán)境和經(jīng)濟(jì)因素，生物處理法有著更為廣闊的前景。但是甲醛對微生物有強(qiáng)烈的抑制作用，高濃度的甲醛能在短時(shí)間內(nèi)對活性污泥體系造成不可回復(fù)的破壞，因此篩選高耐受高效菌株已經(jīng)成為甲醛生物處理的關(guān)鍵。目前，國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)在許多菌屬發(fā)現(xiàn)了能夠降解甲醛的微生物。黃賽花等(2007)報(bào)道（黃賽花,陳能場.一株甲醛降解真菌Aspergillus?app.H4的分離鑒定.生態(tài)環(huán)境,2007,16(4):1175-1179.）篩選得到一株真菌，它能在144h內(nèi)將1.241g/L甲醛降解至0.004g/L；Doronina?等（Doronina?NV,Ezhov?VA,Trotsenko?YuA.Aerobic?biodegradation?of?formaldehyde,methanol?and?methylamine?by?immobilized?Methylobacterium?extorquens?cells.Appl.Biochem.Microbiol.1997,33:138-141.）分離得到一株P(guān)seudomonas?alcaligenes，能在72h內(nèi)完全降解2g/L甲醛；Mirdamadi等（Mirdamadi?S,Rajabi?A,Khalilzadeh?P,Norozian?N,Akbarzadeh?A,Mohseni?FA.Isolation?of?bacteria?able?to?metabolize?high?concentrations?of?formaldehyde.World?J.Microb.Biot.2005,21:1299-1301.）報(bào)道Methylobacterium?extorquens?PSS和ESS能完全降解2.96g/L甲醛，Pseudomonas?pseudoalcaligenes?OSS能在24h完全降解3.7g/L甲醛。但是，迄今為止國內(nèi)外報(bào)道的甲醛降解菌仍然存在耐受濃度低，降解速度慢等缺點(diǎn)，限制了其實(shí)際應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種耐受濃度較高的甲醛降解菌。

本發(fā)明甲醛降解菌，其為采自四川彭山貝爾化工有限公司內(nèi)長期受甲醛污染的土壤中分離得到的新菌株。該菌株已于2012年10月25日在中國典型培養(yǎng)物保藏中心（地址：武漢市武昌珞珈山，武漢大學(xué)，郵編：430072）保藏，分類命名為耶氏副球菌(Paracoccus?yeei)scuhtp-FD3，保藏號為CCTCC?NO.M?2012430。

本發(fā)明甲醛降解菌為革蘭氏陰性菌，菌落為乳白色，呈圓形，表面光滑濕潤，邊緣整齊，中心凸起。本發(fā)明甲醛降解菌經(jīng)16S?rDNA序列測序，結(jié)果在NCBI數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行同源性比對，菌株與Paracoccus?yeei?G1212親緣關(guān)系最近，同源性達(dá)99%以上。菌株的16S?rDNA序列如Seq?ID?NO1所示。

本發(fā)明甲醛降解菌具有高效降解甲醛的能力，該菌株對甲醛的耐受濃度可達(dá)12g/L，48h可將其降解87%，22h可完全降解8g/L甲醛。此菌株的甲醛耐受性和降解速率比已有文獻(xiàn)報(bào)道的甲醛降解菌明顯要高。

本發(fā)明甲醛降解菌可以通過下述方法篩選得到：

1、菌源采自四川彭山貝爾化工有限公司內(nèi)長期受甲醛污染的土壤，采集距表層3-6cm的土壤樣品11份；

2、稱取10g土樣加入到20ml無菌蒸餾水中，充分打散，靜置后取5ml上清液接種于45ml含0.5g/L甲醛的MSM培養(yǎng)基中，于30℃、150rpm培養(yǎng)72h；

3、取培養(yǎng)液5ml轉(zhuǎn)接至新鮮MSM培養(yǎng)基中，甲醛濃度提高至1g/L，同樣條件下培養(yǎng)72h，然后取5mL培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至新鮮MSM培養(yǎng)基中，如此反復(fù)5次，其中甲醛濃度分別為0.5、1、1.5、2、2.5g/L；將含甲醛2.5g/L的馴化液按不同比例梯度稀釋，分別涂布于含甲醛1g/L的MSM平板上，30℃培養(yǎng)3d。挑取邊緣清晰的菌落，經(jīng)BPM培養(yǎng)基平板反復(fù)劃線純化直到獲得單菌落，并分別進(jìn)行甲醛降解實(shí)驗(yàn)；