[發明專利]一種抗腫瘤蛋白質有效
| 申請號: | 201310015845.3 | 申請日: | 2013-01-17 |
| 公開(公告)號: | CN103113468A | 公開(公告)日: | 2013-05-22 |
| 發明(設計)人: | 陳國江;韓根成;王仁喜;肖鶴;侯春梅;黎燕;馮建男;沈倍奮;王一;王柯;劉桂君 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍軍事醫學科學院基礎醫學研究所 |
| 主分類號: | C07K14/71 | 分類號: | C07K14/71;C12N15/12;C12N15/11;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 腫瘤 蛋白質 | ||
1.一種抗腫瘤蛋白質,其特征在于,所述的蛋白質其氨基酸序列如序列表SEQ?ID?NO:6所示。
2.根據權利要求1所述的蛋白質,其特征在于,所述的蛋白質其核苷酸序列如序列表SEQ?ID?NO:5所示。
3.一種擴增權利要求2所述蛋白質核苷酸序列的引物,其特征在于,所述引物包括上游引物和下游引物,其序列如序列表SEQ?ID?NO:3和SEQ?ID?NO:4所示。
4.一種制備權利要求1或2所述蛋白質的方法,包括以下步驟:
1)根據PDGFRL基因序列分析其蛋白活性區域,并設計引物,所述引物的序列如序列表SEQ?ID?NO:3和SEQ?ID?NO:4所示,通過PCR方法擴增目的基因片段,將擴增的目的片段連接到載體上,得到的重組質粒轉化到克隆細胞中,提取重組質粒并測序,同時擴增PDGFRL全長基因作為陽性對照;
2)將測序正確含有目的基因的表達載體轉化到相應的表達細胞中,誘導表達目的蛋白,獲得PDGFRL全長蛋白及其活性區域蛋白,制備蛋白樣品,測蛋白濃度;
3)將上一步得到的蛋白質,通過SDS-PAGE及Western?Blot鑒定,檢測所得蛋白是否表達成功。
5.權利要求4所述的方法,其特征在于,所述的載體為Pet28a(+)。
6.權利要求4所述的方法,其特征在于,所述的表達細胞為E.coli?BL21(DE3)。
7.一種藥物組合物,其特征在于,所述的藥物組合包含權利要求1或2所述的蛋白質。
8.權利要求1或2所述蛋白質在制備治療腫瘤疾病藥物中的應用。
9.根據權利要求6所述的應用,其特征在于,所述的腫瘤為結腸癌。
10.根據權利要求6所述的應用,其特征在于,所述的腫瘤為乳腺癌。
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