[發明專利]一種裸花紫珠中總酚的含量測定方法

在審

• 申請號: 201310015598.7
• 申請日: 2013-01-16
• 公開（公告）號: CN103926212A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 李典鵬;袁莉;黃勝;顏小捷;盧鳳來;潘爭紅;谷陟欣;徐向平;陳珍貴
• 申請（專利權）人: 九芝堂股份有限公司
• 主分類號: G01N21/3577
• 分類號: G01N21/3577;G01N1/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種裸花紫珠中總酚的含量測定方法，其特征在于包括如下步驟：

(1).供試品溶液的制備：

取裸花紫珠藥材適量，用醇溶劑或酮溶劑超聲提取，提取液離心，以上清液為供試品溶液；

(2).標準曲線的制作：精密稱取沒食子酸約10mg作為對照品，置10?ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得濃度為1?mg/ml的對照品儲備液；精密移取1?ml對照品儲備液置于10?ml容量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度為0.1?mg/ml的對照品溶液；再分別精密吸取對照品溶液于5ml量瓶中配制成梯度的標準溶液，加入顯色劑顯色，以50%甲醇為空白對照，照紫外-可見分光光度法，在760nm波長下，分別測定吸光度，以沒食子酸含量為橫坐標，以其吸光度值為縱坐標，得沒食子酸含量測定標準曲線；

(3).樣品溶液總酚的含量測定：精密量取0.1ml步驟（1）所述的供試品溶液，加入顯色劑顯色，以相應試劑為空白對照，照紫外-可見分光光度法，在760nm波長下測定吸光度值，根據該吸光度值，由標準曲線得對應的濃度，該濃度值即為供試品溶液總酚的含量；

(4).藥材中含量的計算：根據步驟（3）所得的供試品溶液中總酚的含量，換算出裸花紫珠藥材中總酚的含量。

2.根據權利要求1所述的含量測定方法，其特征在于，步驟（1）中醇溶劑為40~60%的甲醇或乙醇，酮溶劑為40~60%丙酮。

3.根據權利要求1所述的含量測定方法，其特征在于，步驟（1）中超聲提取的液料比為120:1~250:1，離心速率為10000~15000r/min，提取時間0.5~1.5h。

4.根據權利要求1所述的含量測定方法，其特征在于，步驟（1）為：

供試品溶液的制備：

裸花紫珠用50%的丙酮超聲提取，提取時間為1小時，液料比為250:1，提取液以10000r/min離心，離心1?min后，精密量取上清液1-5ml置25ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成供試品溶液。

5.一種裸花紫珠提取物中總酚的含量測定方法，其特征在于包括如下步驟：

(1).供試品溶液的制備：

精密稱取0.01~0.05g裸花紫珠提取物粉末，置25ml量瓶中，加50%甲醇10~20ml超聲溶解，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，所得濾液制成供試品溶液；

(2).標準曲線的制作：精密稱取沒食子酸約10mg作為對照品，置10?ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得濃度為1?mg/ml的對照品儲備液；精密移取1?ml對照品儲備液置于10?ml容量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度為0.1?mg/ml的對照品溶液；再分別精密吸取對照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的標準溶液，加入顯色劑顯色，以50%甲醇為空白對照，照紫外-可見分光光度法，在760nm波長下，分別測定吸光度，以沒食子酸含量為橫坐標，以其吸光度值為縱坐標，得沒食子酸含量測定標準曲線；

(3).樣品溶液總酚的含量測定：精密量取0.1ml步驟（1）所述的供試品溶液，加入顯色劑顯色，以相應試劑為空白對照，照紫外-可見分光光度法，在760nm波長下測定吸光度值，根據該吸光度值，由標準曲線得對應的濃度，該濃度值即為供試品溶液總酚的含量；

(4).提取物中含量的計算：根據步驟（3）所得的供試品溶液中總酚的含量，換算出裸花紫珠提取物中總酚的含量。