[發明專利]從三裂葉蟛蜞菊中分離制備對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸的方法

有效

• 申請號: 201310015575.6
• 申請日: 2013-01-16
• 公開（公告）號: CN103086879A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 高坤;陳佳;陳艷君
• 申請（專利權）人: 浙江大學寧波理工學院
• 主分類號: C07C61/35
• 分類號: C07C61/35;C07C51/47;C07C51/42
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

技術領域

本發明涉及藥用植物有效成分提取技術領域，特別涉及一種從三裂葉蟛蜞菊中分離制備對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸的方法。

背景技術

對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸（ent-KA）最早是從墨西哥傳統的抗生育草藥Montanoa?tomentosa（Zoapatle）中分離得到，參見文獻：Journal?of?ethnopharmacology?(1986),?18(1),?89-94。曾有文獻報道，化合物ent-KA?對人體鼻咽癌細胞（KB）和胃癌細胞（BGC-823）有很強的毒性，參見文獻：（1）Phytotherapy?Research?(2002),?16,?387–388?和（2）黑龍江醫藥(2006),?19,?26-27。該化合物和其衍生物有很大的抗腫瘤研究價值和應用前景。現已經有文獻披露從其它一些植物中也可分離得到這種物質，但含量都很少。所以從生長繁殖能力強的植物中以較高的提取率來提取該化合物成為研究的熱點。

三裂葉蟛蜞菊即南美蟛蜞菊（Wedelia?trilobata）為菊科（Compositae）蟛蜞菊屬（Wedelia）植物，多年生草本，原產熱帶美洲，群落中很少有其它雜草，具有極強的入侵性，已經在許多熱帶、亞熱帶地區形成危害，被列為“世界上最有害的外來入侵物種”之一。生性強健，綠化迅速，能抑制雜草生長，常長大片生長。繁殖容易，摘取莖葉扦插即可成活。國內外曾經對南美蟛蜞菊的化學成分進行研究，發現對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸是其主要活性成分。但常規的提取方法得到的產品純度較低、收率較低、操作麻煩、生產工藝周期長、且重復性差，不利于大規模生產，不能滿足市場需求。

超臨界流體萃取是使用高于臨界溫度、臨界壓力的流體作為溶劑的萃取過程。處于臨界點附近的流體不僅對物質具有極高的溶解能力，而且物質的溶解度隨體系的壓力或溫度的變化而變化，從而通過調節體系的壓力或溫度就可方便地進行選擇性地萃取分離物質。超臨界萃取被視為環境友好且高效節能的新的化工分離技術在很多領域得到廣泛重視和開發。在溶劑分離與回收方面超臨界萃取優于一般液—液萃取和精餾，被認為是萃取速度快、效率高、能耗少的先進工藝。超臨界流體萃取在中草藥及天然產物提取分離方面具有低溫、快速、收率高、產品純天然等特點。該技術對實現中藥現代化具有重要的應用前景。

發明內容

本發明的目的在于提供一種萃取速度快、效率高、能耗少的從三裂葉蟛蜞菊中分離制備對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸的方法，獲得的產品收率高、純度高。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種從三裂葉蟛蜞菊中分離制備對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸的方法，將三裂葉蟛蜞菊干燥，粉碎，過篩，稱取三裂葉蟛蜞菊粉末200-300g裝入超臨界萃取儀的萃取釜中，夾帶劑選用60-95?wt%乙醇，控制萃取壓力為20-25?MPa，萃取溫度為40-60℃，CO₂流量為30-40L/h，萃取時間2-3h；然后減壓濃縮去除乙醇得到總浸膏（40-50g），總浸膏溶于100-200ml水中，用100-200ml乙酸乙酯萃取三次，合并有機相，有機相減壓濃縮去除乙酸乙酯得到浸膏（20-30g），浸膏上D101型大孔吸附樹脂，用50-60wt%乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮獲得粗晶，粗晶用石油醚重結晶，即得對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸。

本發明針對三裂葉蟛蜞菊本身特性，開發適合的工藝，采用二氧化碳臨界萃取技術來提取三裂葉蟛蜞菊的有效成分對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸，所用溶劑二氧化碳具有無毒、無味、不燃、不腐蝕、價格便宜、易于精制等優點。與傳統溶劑提取法相比，步驟相對少，流程短，操作參數也易于控制，是產品質量穩定且無有害溶劑的殘留；不僅萃取效率高、能耗低，而且萃取物雜質減少、有效成分高度富集。提取過程中通過使用60-95?wt%乙醇作為夾帶劑，增加了對目標化合物提取的選擇性和效率。采用D101型大孔吸附樹脂脫色處理與已有硅膠柱層析提純的技術相比，具有工藝步驟相對少，流程短，填料成本低，溶劑用量少等優點。

控制洗脫時，乙醇水溶液濃度為50-60wt%，該濃度洗脫液下的目標產物（即對映貝殼杉烷-16-烯-19-酸）收率高，且受雜質成分干擾最少。

作為優選，所述夾帶劑的流速是10-12ml/min，夾帶劑加入量是1000-1200ml。控制夾帶劑的流量和加入量，提高了對目標化合物提取的選擇性和效率。

作為優選，浸膏與樹脂的質量比為1:5-10。這樣分離純化效果好。