[發(fā)明專利]通過補(bǔ)加低聚木糖調(diào)整發(fā)酵纖維素復(fù)合酶配比的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310014065.7
• 申請日: 2013-01-15
• 公開（公告）號: CN103045568A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 熊鵬;宇文偉剛;賀建龍;徐繼明
• 申請（專利權(quán)）人: 熊鵬
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12R1/885
• 代理公司: 淮安市科翔專利商標(biāo)事務(wù)所 32110
• 代理人: 韓曉斌

1.通過補(bǔ)加低聚木糖調(diào)整發(fā)酵纖維素復(fù)合酶配比的方法，其特征是：利用低聚木糖抑制纖維素復(fù)合酶中外切葡聚糖酶活性的原理，促使在纖維素酶發(fā)酵中其刺激生物菌體分泌更多的內(nèi)切酶和β葡萄糖苷酶，導(dǎo)致最終生成的纖維素酶整體酶活依然保持很高的水平下，β葡萄糖苷酶在纖維素復(fù)合酶中的比例得到較多提升；包括以下具體步驟：

（1）培養(yǎng)基配制：微晶纖維素30g/L，蛋白胨10g/L，(NH₄)₂SO₄?5?g/L，KH₂PO₄?2?g/L，MgSO₄·7H₂O?0.3g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O?5mg/L，ZnSO₄·7H₂O?1.4mg/L，MnSO₄·7H₂O?1.6mg/L配制培養(yǎng)基，于121℃滅菌20min，培養(yǎng)基在發(fā)酵罐中的裝液量為發(fā)酵罐裝液容量的60%~80%；

（2）菌種培養(yǎng)：里氏木霉孢子液（~10⁷CFU）按玉米漿培養(yǎng)基質(zhì)量的5%的接種量接至5g/L玉米漿培養(yǎng)基中，30度搖床培養(yǎng)；

（3）接種與產(chǎn)酶發(fā)酵：以培養(yǎng)基體積的1%~5%（v/v）的接種量接種培養(yǎng)24小時(shí)的里氏木霉種子液于發(fā)酵罐中發(fā)酵，發(fā)酵過程參數(shù)控制為：溫度30℃，溶解氧不低于20%，通氣量0.1~0.3vvm；

（4）過程補(bǔ)料：在發(fā)酵培養(yǎng)48~96小時(shí)補(bǔ)加1~10g/L低聚木糖；

（5）收集：結(jié)束發(fā)酵，收集發(fā)酵液用來制備纖維素酶。